Мікробіологія з технікою мікробіологічних досліджень – гонококи. Мікробіологія Збудник гонореї

Мікробіологія: конспект лекцій Ткаченка Ксенія Вікторівна

4. Гонококи

4. Гонококи

Належать до роду Neisseria, вид N. gonorrhoeae.

Це диплококи бобовидної форми, в мазках розташовуються внутрішньоклітинно в протоплазмі лейкоцитів, мають вигляд кавових зерен.

Суперечка не утворюють, нерухомі, утворюють мікрокапсулу, грамнегативні. Є облігатними аеробами.

Гонококки винятково вимогливі до живильних середовищ, ростуть тільки на середовищах, що містять людські білки (сироватковий агар, асцит-агар та ін). На сироватковому агарі утворюють дрібні блискучі колонії у вигляді крапель.

Біохімічно малоактивні, розщеплюють лише глюкозу (до кислоти).

Антигени гонококів:

1) білкові антигени зовнішньої мембрани;

2) ліпополісахаридні антигени клітинної стінки.

Загальноприйнятого поділу на серогрупи та серовари немає.

Фактори вірулентності:

1) адгезини – фімбрії (пили);

2) ендотоксин; пригнічує фагоцитоз, забезпечуючи внутрішньоклітинне розташування гонококів;

3) ферменти агресії – гіалуронідаза, нейрамінідазу.

Патогенні лише для людини. Викликають лише специфічні нозологічні форми гнійно-запальних захворювань.

Гонококова інфекція – антропонозна інфекція, джерело зараження – хвора людина, носія не буває. Шлях передачі статевої, можливе зараження новонародженого під час проходження через родові шляхи хворої матері.

Клінічні форми гонококової інфекції:

1) гонорея (урогенітальна, екстрагенітальна);

2) гонококова септикопіємія;

3) специфічний кон'юнктивіт новонароджених (виникає лише при проходженні через родові шляхи хворої на гонорею матері).

За тривалістю перебігу гонореї та вираженості клінічних ознак розрізняють:

1) свіжу гонорею (тривалість перебігу трохи більше 2 місяців):

а) гостру;

б) підгостру;

в) торпідну;

2) хронічну гонорею (мляве поточне захворювання тривалістю більше 2 місяців або з невстановленим терміном).

За клінічним перебігом розрізняють:

1) неускладнену гонорею (гнійне запалення нижніх відділів урогенітального тракту);

2) ускладнену гонорею (процес поширюється на верхні відділи сечостатевої системи).

Перенесене захворювання не залишає стійкого імунітету.

Діагностика:

1) при гострій формі:

а) бактеріоскопія мазка уретри, що відділяється, шийки матки;

2) при хронічній формі:

а) бактеріоскопія;

б) бактеріологічне дослідження;

в) серодіагностика – РЗК;

г) імуноіндикація.

Особливість серодіагностики: діагноз ставиться якісно (з виявлення у сироватці обстежуваного антитіл) за результатами одноразової реакції (без парних сироваток). Це тим, що постинфекционный імунітет при гонореї не формується (немає постинфекционных антитіл).

Лікування: етіотропна терапія антибіотиками.

Гонококи мають бобоподібну форму, розташовуються у вигляді диплококів, оточені мікрокапсулою, джгутиків не мають, спір не утворюють, аналогічно менінгококам. У клітинній стінці є зовнішня мембрана, білки якої поділяють на групи по їх функціональному значенню. Для гонококів характерна наявність пилок, які відрізняються один від одного за своїми антигенними властивостями (16 антигенних варіантів). Гонококи культивують на живильних середовищах, що містять нативний білок(Сироватка крові, асцитична рідина). Краще ростуть при вмісті 3-5% СО2. На асцитагар утворюють прозорі колонії з рівними краями. З вуглеводів ферментують лише глюкозу, утворюють каталазу та цитохромоксидазу – типові для нейссерій ферменти.

Антигени

Антигенна структура гонококів мінлива. Це з наявністю численних антигенних варіантів пилок, які формуються у процесі розвитку інфекції.

Патогенність та патогенез

Гонококи прикріплюються до циліндричного епітелію уретри, вагінальної частини шийки матки, прямої кишки, кон'юнктиви ока, а також сперматозоїдів та найпростіших (трихомонади, амеба). Адгезія відбувається за рахунок пилок та білків зовнішньої мембрани клітинної стінки. Характерною особливістюГонококи є їх здатність проникати в лейкоцити і розмножуватися в них. Ліпоолігосахаридна частина клітинної стінки має токсичну дію. Капсулярні полісахариди пригнічують фагоцитоз. З'єднуючись з ворсинками циліндричного епітелію слизової оболонки уретри, а у жінок і ендоцервікального каналу, гонококи проникають усередину клітин за участю білків зовнішньої мембрани клітинної стінки. Це призводить до розвитку гострого уретриту, цервіциту та ураження у жінок шийки матки, придатків (труби, яєчники), у чоловіків насінних бульбашок, передміхурової залози. При екстрагенітальній локалізації гонококи можуть пошкоджувати пряму кишку та мигдалики, а також викликати бленорею (кон'юнктивіт) у новонароджених. Зараження відбувається під час проходження родових шляхів матері, хворої на гонорею.

Імунітет

При гонореї має місце гуморальна імунна відповідь. Однак антибактеріальні антитіла, що утворюються, не мають протективних властивостей. Протягом захворювання утворюються IgA, що пригнічують прикріплення пилок збудника до клітин слизової оболонки уретри. Однак вони не здатні захистити слизову оболонку від подальшого зараження іншими генераціями гонококів, що пов'язано зі зміною їх антигенної структури. Це призводить до реінфекцій та рецидивів, а також до переходу захворювання в хронічну форму.

Гонококові інфекції

Збудник гонореї та бленореї N.gonorrhoeae (за попередньою класифікацією гонокок) належить до сімейства Neisseriaceae, роду Neisseria. У мазках із виділень хворих гонококи мають форму кавових зерен, грамнегативні, розташовуються парами як усередині лейкоцитів (незавершений фагоцитоз), так і поза клітинами. За своїм морфологічними ознакамивони дуже схожі на менінгококи. Для гонококів властивий поліморфізм – зустрічаються дрібні та великі клітини, рідко паличкоподібної форми. До поживних середовищ дуже примхливі. Найкраще ростуть на середовищах, що містять кров, сироватку, асцитичну рідину. Гонококи містять протеїнові та полісахаридні антигени, за якими розділені на 16 сероварів, але в рутинних баклабораторіях їх поки не визначають. мікробіологічної діагностикигонококових інфекцій використовують бактеріоскопічний, бактеріологічний, серологічний та алергічний методи.

Взяття матеріалу для дослідження

Щоб гідно та доброякісно провести бактеріологічну та бактеріоскопічну діагностику, важливо правильно взяти клінічний матеріал. Його, як правило, повинен проводити лікар. У чоловіків досліджують виділення сечівника, парауретральних ходів, прямої кишки, при показаннях – матеріал з ротоглотки, а також секрет передміхурової залози після її масажу. Можна також дослідити осад і нитки сечі, але в них гонококи виявляються значно рідше. Перед взяттям матеріалу з уретри хворий не повинен помочитися протягом 4-5 годин, не вживати антимікробних препаратів та дезінфікуючих розчинів. Зовнішнє отвір уретри спочатку протирають стерильним ватним тампоном, змоченим 0,85% розчином хлориду натрію, потім сухим тампоном. Мазки виготовляють не з гною, вільно витікає, а з матеріалу, взятого шляхом зіскрібку зі слизової уретри бактеріологічною петлею або спеціальною ложечкою Фолькмана. При незначних виділеннях необхідно зробити попередній масаж уретри. У жінок матеріал беруть із уретри, парауретральних ходів, шийки матки, прямої кишки, а за показаннями – і з ротоглотки. Спочатку очищають піхву від виділень, проводять масаж уретри і шляхом зішкрібання бактеріологічною петлею або ложечкою Фолькмана забирають матеріал. Шийку матки спочатку протирають сукиним стерильним ватним тампоном для видалення слизової пробки. Виділення з каналу шийки матки беруть бактеріологічною петлею або пінцетом. Матеріал з дистального відділу прямої кишки беруть за допомогою ложечки Фолькмана сліпим методом", тобто без будь-якої підготовки хворого, або за допомогою рекоскопа або ректального дзеркала. У цьому випадку матеріал, що вивчається, забирають безпосередньо з видимого місця ураження. При орофарингеальному гонореї слиз з ротоглотки беруть стерильними ватними тампонами на спеціальних тримачах із сталевого дроту.Для діагностики "ленореї виділення кон'юнктиви знімають бактеріологічною петлею. Рідко гонорея ускладнюється гоносепсисом, ендокардитом, артритом. Тоді матеріалом для юслідження служить кров чи синовіальна рідина. Зважаючи на високу - V тливість гонококів до коливань температури, досліджувані матеріали доставляють до лабораторії у спеціальних термосах або сумках з грілкою.

Бактеріоскопічне дослідження

Бактеріоскопічне дослідження є найпоширенішим, хоч і менш чутливим методом лабораторної діагностикигонореї та бленореї в порівнянні з виділенням-істих культур. Це особливо стосується хронічного перебігу хвороби, коли в досліджуваному матеріалі міститься незначна кількість гонококів. Однак при правильному взятті матеріалу, повторних обстеженнях пацієнтів, застосуванні методів провокації, кваліфікованій оцінці мазків бактеріоскопічне дослідження досить часто дає можливість швидко та правильно діагностувати захворювання. З досліджуваного матеріалу виготовляють два тонкі рівномірні препарати-мазки. Один фарбують метиленової синькою, другий-за методом Грама. За відсутності метиленового синього можна фарбувати один мазок 1% водним розчином кристалічного фіолетового або 0,5% розчином зеленого діамантового протягом 1 хв. Висновок про наявність гонококів роблять, ґрунтуючись на таких їх властивостях: грамнегативне забарвлення, диплококова структура, форма кавових зерен, розташування всередині лейкоцитів. Окремі клітини набувають різної форми та величини (так звані форми Аша). Крім того, в досліджуваному матеріалі можуть знаходитися подібні гонококків грамнегативні коки з роду Veillonella. Це певною мірою обмежує діагностичну цінність методу первинної мікроскопії. Кращі та надійні результати дає метод імунофлюоресценції. Тонкі мазки із виділень хворих фіксують у полум'ї пальника. На них наносять мічену ізотіоціанатом флуоресцеїну антигонококову сироватку на 1 годину при 35 ° С у вологій камері. Після цього мазки двічі промивають буферним розчином, наносять забуферений гліцерин і покривають покривним склом. При взаємодії гонококів із міченими антитілами під люмінесцентним мікроскопом видно характерне світіння навколо бактеріальних клітин.

Бактеріологічне дослідження

Показаннями до виділення чистих культур гонококів є неодноразові негативні результати бактеріоскопії, наявність підозрілих щодо гонококів, але не ідентифікованих морфологічно мікроорганізмів, а також для достовірного встановлення вилікуваності захворювання. Дуже важливо негайно помістити посіви у термостат. При неможливості проведення посівів на місці взяття матеріалу можна висів ватним тампоном у пробірку з транспортним середовищем Стюарта, яке забезпечує збереження життєздатності гонококів під час доставки до лабораторії. стандартною схемоюв один із спеціальних поживних середовищ у пробірках або чашках Петрі (КДС, Бейлі, кров'яний або сироватковий агар, сухого живильного середовища Харківського підприємства "Біолік" з виробництва бактеріальних та лікарських препаратів). Для діагностичного культивування гонококів у багатьох країнах використовують ще "шоколадний" агар. Найкращими є середовища, виготовлені на основі агару з кролячого м'яса або свіжих бичачих сердець. Додавання до них 20 ОД/мл поліміксину та 2 мкг/мл лінкоміцину значно підвищує частоту висіву гонококів, оскільки зазначені препарати пригнічують зростання інших бактерій. Усі середовища перед посівом підігрівають у термостаті протягом 15-20 хв. Чашки та пробірки з посівами поміщають в ексікатори, де створюють атмосферу з 20% С02. Колонії, як правило, виростають через 18-24 год, проте можливе і пізнє зростання. Тоді посіви витримують у термостаті (в ексикаторі!) до 8 діб, щодня перевіряючи появу росту. Колонії гонококів, що виросли мають круглу, злегка опуклу форму, рівні краї, блискучу поверхню, слизову консистенцію. Вони прозорі, як крапельки роси, майже безбарвні, хоча можуть траплятися й білуваті варіанти. Отримані колонії досліджують макро- та мікроскопічно. У мазках гонококи розташовуються парно, зошитами та скупченнями. Типові колонії пересівають на скошений агар сироватковий для виділення чистої культури. Остаточну ідентифікацію проводять, враховуючи морфологічні, культуральні, ферментативні та антигенні властивості. Біохімічно гонококи мало активні. На сироваткових середовищах з 1,5% різних вуглеводів вони розкладають тільки глюкозу, але не мальтозу та сахарозу. Оксидазну активність виділених культур визначають шляхом нанесення на колонії (після мікроскопії) 1% розчину диметилпарафенілендіаміну. Диференціація гонококів від інших видів роду Neisseria має особливе значення при діагностиці орофарингеальної гонореї. Як відомо, на слизовій мигдалин, рото- та носоглотки постійно знаходиться велика кількістьграмнегативних нейссерій – представників нормальної мікрофлори людини. Надійними методами ідентифікації гонококів є реакції імунофлюоресценції, латекс- та коаглютинації, а також визначення ферментативних властивостей. Обов'язково проводять якісне визначення чутливості або резистентності мікроорганізмів до антибіотиків за допомогою методу дифузії в агар з використанням дисків. , тобто штучного загострення патологічного процесу, внаслідок чого у виділеннях з'являється більша кількість гонококів. Основними з цих методів є: а) хімічний - інстиляція в уретру 0,5% розчину нітрату срібла у чоловіків, змазування каналу шийки матки 2-5% розчином нітрату срібла; б) механічне - введення прямого бужу в уретру на 10 хв, або проведення передньої уретроскопії; в) біологічний - внутрішньом'язове введення гоновакцини в кількості 500 млн. мікробних тіл або пірогеналу 200 МПД; г) аліментарний - вживання солоної, гострої їжі; менструацій. Ще краще комбінувати кілька методів провокації, наприклад, хімічний, аліментарний та біологічний. Останнім часомдля більш надійного виявлення збудника гонореї приймають полімеразної ланцюгової реакції. Вона дозволяє виявити збудника у випадках хронічної гонореї, коли бактеріоскопічне та бактеріологічне дослідження не дає позитивних результатів.

Серологічна діагностика

Серологічну діагностику гонореї здійснюють порівняно рідко, в основному, при її хронічному перебігу, коли бактеріоскопічне та бактеріологічні дослідження не дають позитивних результатів. У сучасних умовахпроводять імуноферментний аналіз, РНГА та реакції Борде-Жангу (РСК). Антигенами для цих реакцій є: вбита нагріванням полівалентна гонококова вакцина, вакцина, інактивована ультразвуком, протеїнові та полісахаридні фракції гонококів, а також піридиновий антиген. ІФА та РНГА є високоспецифічними та достовірними серологічними реакціями. Порівняно з минулим РСК дещо втратила свою роль. Вона не має практичного значення при діагностиці гострої гонореї, оскільки її лікують ще до утворення значної кількості антитіл. Для встановлення достовірності лікування вона взагалі непридатна. Реакція Борде-Жангу має важливе значення при серодіагностиці хронічної гонореї, особливо при ускладнених його формах (гоносепсис, метрит, артрит простатит та ін.). Діагностичне значення алергічних проб дещо знецінюється тим, що вони позитивні протягом багатьох років після перенесеної гонореї. Для їх постановки внутрішньошкірно вводять 0,1 мл свіжої гонококової вакцини (100 млн мікробних клітин на 1 мл). Через 24 години спостерігають гіперемію, іноді з набряком у центрі.

Лікування та профілактика

Для хіміотерапії гонореї використовують антибіотики: бета-лактами (пеніциліни, цефалоспорини) та інші антибіотики. Вакцинопрофілактика гонореї не проводиться через відсутність ефективних вакцин. Для попередження бленорії всім новонародженим закопують на кон'юнктиву ока розчин одного з перерахованих антибіотиків.

Гонококи - Це грамнегативні, нерухомі, що не має капсули, неспоротворні диплококи. У мазках коки прилягають плоскими поверхнями один до одного і за контуром схожі на кавові зерна. Він має характерну для грамнегативних мікроорганізмів клітинну структуру, і може розмножуватися поза, і всередині клітин господаря. Немає внутрішньовидових варіантів.

Neisseriae gonorrhoeae (гонокок) є збудником гонореї - широко поширеної заразної інфекції, що передається статевим шляхом. Хвороба була відома ще древнім китайцям, єгиптянам, іудеям. Назву свою отримала від двох грецьких слів gone – насіння і rhein – витікання, тобто хвороба, що передається із насіннєвою рідиною. Так назвав її Гален на початку нової ери. Гонококи також називають диплококами - ця назва дано йому німецьким лікарем Альбертом Нейссером, який в 1879 році виявив його в гнійному відділяється уретри, шийки матки і кон'юнктиви очей. Збудник був названий на честь Нейссер - Neisseriae gonorrhoeae.

Гонококки. Загальна характеристика

Гонорея - це хвороба, що супроводжується виділеннями з урогенітального тракту, спочатку рідкими, водянистими, а потім гнійними. Інкубаційний період короткий – 3-5 днів. У перші дні хвороби гонококи виявляються вільно лежать у серозному ексудаті або прикріпилися до епітеліальних клітин. Коли відокремлюване стає гнійним, коки фагоцитуються і їх можна побачити в цитоплазмі клітин гною (доліморфонуклеарні нейтрофільні лейкоцити). В одній клітині можуть бути від 20 до 100 гонококків, які будучи поглиненими, не гинуть і залишаються вірулентними. У пізній стадії хвороби вони можуть бути виявлені поза клітинами, у стадії формування хронічного процесу частіше взагалі не виявляються.

Гонококи - Дуже примхливі мікроби, не ростуть на звичайних поживних середовищах, його важко вдається культивувати на спеціально приготованих для них збагачених середовищах. Краще ростуть при трохи зниженій (до 35,5 ° С) температурі в присутності кисню і 10% 2 .

Описано 4 типи колоній:
– гонококи 1 і 2 типу утворюються вірулентними гонококками;
– гонококи 3 та 4 типу – невірулентними.
Коки, що утворюють калоші 1 і 2 типів, мають пили – фактор адгезії. Саме пилками бактерія прикріплюється до клітин циліндричного епітелію уретри, лійки матки, прямої кишки і не фагоцитується, а заселяє клітини цих відділів (колонізація). Прикріплення – необхідна умоваінфекції, тільки бактерії, що мають пили, вважаються патогенними.

Гонококи продукують фермент індофенол оксидазу, що каталізує відновлення молекулярного кисню незалежно від перекису водню. Проба на оксидазу використовується для ідентифікації колоній у лабораторних культурах. Гонококи , що відносяться до всіх типів, продукують фермент, що розщеплює секреторний IgA, що знаходиться в секретах слизової оболонки.

Незважаючи на те, що гонококи в організмі хворого насилу, вони вкрай нестійкі у зовнішньому середовищі. Вони гинуть дуже швидко на сонячному світлі та при висушуванні. У гнійному або на білизні, що знаходиться в темному вологому місці, можуть зберігатися від 18 до 24 годин. Дуже чутливі до дезінфікуючих засобів, особливо солей срібла. Температура +60 ° С вбиває їх через 10 хвилин.

Хоча гонококи чутливі до впливу сучасних антибіотиків, лікарська стійкість створює все більш серйозні проблеми, особливо у разі штамів N.gonorrhoeae, які продукують пеніциліназ. Вперше ці штами виявлені у США на початку 1976 року, а завезені були з Південно-Східної Азії та Філіппін. Продукуючий пеніциліназ (β-лактамазу) ген у гонококків знаходиться в плазмідах з нуклеотидними послідовностями, схожими з тими, які зумовлюють стійкість до пеніциліну деяких грамнегативних ентеробактерій. Деякі гонококи можуть передавати свої (3-лактамазні плазміди «статевим» (коньюгативним) шляхом).

Гонококки. Патогенність

Гонококи пошкоджують циліндричний епітелій, що вистилає шийку матки і пряму кишку, а також проміжний (урогенітальний) епітелій, що вистилає сечовий тракт. Вагінальна інфекція не виявляється, оскільки епітелій, що вистилає вологу дорослої жінки– це ороговіючий багатошаровий плоский епітелій, стійкий до гонококів. До настання статевої зрілості вагіна вистелена більш м'яким, особливо сприйнятливим епітелієм. Гонорейний вульвовагініт у препубертатних дівушок може бути епідемічним і важко виліковується. Зміна епітелію із закінченням пубертатного періоду повністю виключає цю форму гонореї.

В даний час важливим первинним місцемінфікування є кон'юнктива ока, і цей процес (гонорейний кон'юнкти-віт і кератит) активно ушкоджує очі. Ophthalmia neonatorum - гонорейний кон'юнктивіт новонароджених, виникає при інфікуванні очей плода під час проходження через родові шляхи. Рясні гнійні виділення з ока новонародженого можуть створити значний тиск під століттями. Якщо повіки насильно розімкнути, гній може бризнути назовні. Лікарі та медичний персонал, які лікують таких дітей, повинні ретельно оберігати свої очі. У дітей або дорослих така інфекція легко призводить до сліпоти або серйозного погіршення зору внаслідок запальних змін структур ока.

Гонококова інфекція із чоловічої уретри може безпосередньо проникати в інші частини чоловічої репродуктивної системи. У жінок вона також може проникати в інші частини тракту, особливо в Бартолінієві залози та фалопієві труби.

Слизова матки стійка до впливу гонококів, але застосування контрацептивів може полегшити впровадження гонококів в ендометрій, збільшуючи ризик ускладнень у фалопієвих трубах. Інфікування фалопієвих труб зазвичай відбувається в перший або другий менструальний циклпісля зараження, але у деяких випадках воно відбувається пізніше.

Залучення у запальний процес фалопієвих труб (сальпін-гіт) призводить до значного їх перекручування та рубцювання у разі, коли захворювання набуває хронічної форми.

Рубцювання уретри у чоловіків може призвести до стриктури або облітерації сечівника в одній або декількох фо-кальних точках.

Іноді гонококи мігрують з сечостатевого тракту в лімфатичну систему або кровотік, утворюючи дистантні фокуси інфікування (наприклад, ендокардит, перигепатит і менінгіт).

Гонококцемія пов'язані з різними шкірними ушкодженнями, у тому числі можуть бути виділені мікроорганізми. Істотним проявом екстрагенітальної гонококової інфекції є гнійний деструктивний артрит, що особливо часто зустрічається у осіб віком від 15 до 35 років. Зі збільшенням числа випадків захворювання на гонорею, екстрагенітальні пошкодження стають більш помітними.

Гонококки. Джерела та шляхи зараження інфекцією

Гонококи ніколи не виявляються поза людським організмом, якщо тільки вони не знаходяться на об'єктах, зовсім недавно забруднених гонорейними виділеннями. Тому гонорейні інфекції практично завжди поширюються шляхом прямих контактів, переважно при статевому акті. Вкрай рідко гонорея вдається непрямим шляхом через забруднені об'єкти,

Гонорейна офтальмія у дорослих зазвичай є випадковою. Інфекція з урогенітального тракту ненавмисно заноситься в очі руками самого хворого або: іншої особи.

Вульвовагініт серед дітей поширюється шляхом використання загальної постільної білизни, ванни, туалетного приладдя тощо. Він зазвичай виникає там, де діти живуть у перенаселених квартирах.

Неліковані гонорейні інфекції мають тенденцію переходити до хронічного стану. При відсутності лікування або неправильному лікуванні жінки стають бактеріоносіями протягом багатьох років після зникнення ознак захворювання. У 60-80% інфікованих жінок хвороба протікає безсимптомно. Приблизно у 40% чоловіків хвороба також протікає безсимптомно.

Гонококки. Лабораторний діагноз інфекції

Для встановлення діагнозу гонореї використовують кілька мікро-біологічних методів. Мазки, культури та оксидазна реакція є попередніми тестами. Для встановлення точного ді-агнозу гонореї і підтвердження результатів попередніх тестів використовується метод флуоресціюючих антитіл і реакція ферментації карбогідрату.

Бактеріоскопічна діагностика.Прямі мазки генітальних виділень можуть бути пофарбовані за Грамом. Виявлення грамнегативних дипло-коків у гнійних клітинах генітального ексудату є сильним аргументом на користь того, що це гонококи. Це особливо правильно, якщо відокремлюване взято з чоловічої уретри, де, у разі типового гострого гнійного уретриту, пофарбований за Грамом мазок, що містить ясно видимі внутрішньоклітинні диплококи передбачає однозначний діагноз.

У жінок типові диплококи можуть виявлятися в мазках матеріалу, взятого з бартолінієвих залоз і залоз Скена на ранній стадії захворювання. Але на підставі тільки цього не можна поставити навіть робочий діагноз.

Причин наскільки:
1. грамнегативні диплококи (але не гонококи) зустрічаються поза клітинами;
2. гонококи поодинці або парами зустрічаються поза клітинами;
3. у клітинах зустрічаються грампозитивні мікроорганізми з морфологією гонококів.

Все, що можна сказати про грамнегативні диплококи, що виявляються поза клітинами, - так це те, що вони можуть бути гонококами. Дуже рідко всередині гнійних клітин генітального ексудату знаходять грамнегативні дип-лококо, які не є гонококами.

Мазок, виготовлений з гонорейного ексудату, має бути дуже тонким. Гонококи реагують на забарвлення за Грамом таким чином, що у разі товстого і нерівномірного по товщині мазка може бути отриманий помилковий результат. У разі хронічної гонореї мікроби зазвичай не виявляються в ексудаті.

Культуральні методи мають особливе значення в діагностиці хронічного захворювання та оцінці ефективності лікування. Культивування «ніжних» гонококів можливе тільки на спеціально збагачених середовищах (кров'яний агар, асцитний агар та ін). Найбільш підходящими є спеціальні середовища з додаванням антибіотиків, що пригнічують зростання грибів і бактерій роду Proteus, але до яких гонококи нечутливі,

Розроблено спеціальні транспортні середовища, які дозволяють надсилати підозрювані культури для подальшої ідентифікації. При цьому використовують пробірки з пробками, що загвинчуються, містять середовище і суміш повітря з СО 2 . Після інокуляції матеріалу зростання гонококів підтримується протягом 48-96 годин.

Згідно з сучасними рекомендаціями, матеріал, підозрілий на виділення культури гонокока, повинен бути отриманий не тільки з урогенітального тракту (ендоцервікального каналу, передньої уретри), але і з аноректальної області та горлянки. Ректальну гонорею можна легко переглянути. Ретельна роботаз використанням тампонів необхідна під час обстеження чоловіків-гомосексуалістів. У жінок необхідно кричати цервікальні та ректальні мазки, оскільки у 50% інфікованих жінокгонококи осідають у рек-тальної області. Інфекція може залишатися там після того, як вона зникне з шийки матки.

Стерильні ватяні тампони часто містять жирні кислоти та інші речовини, які пригнічують зростання гонококів. Тому для взяття зразків рекомендується використовувати нейтральні щодо цього тампони, наприклад з альгінату кальцію.

Гонококи можуть бути отримані з сечі чоловіків, якщо перші 10 мл сечі, що виділяється, центрифугувати і виділити культуру з осаду. При більш простому методіскринінгу перші кілька крапель сечі, що потрапили на сухий тампон, негайно переносяться на середу. Культури сечі при скринінгових програмах допомагають встановити джерело інфекції, серед чоловіків з безсимптомним перебігом захворювання.

Наступним щаблем у бактеріологічному вивченні гонококів є якісний аналіз біохімічних реакцій та ідентифікація мікроорганізмів за допомогою антисироваток. Наявність у гонококків специфічного К-антигена дає можливість використовувати метод флуоресціюючих антитіл, при виявленні гонококів у прямих мазках або ексудаті, або в мазках, приготовлених на культур.

Гонококки. Соціальне значення гонореї

Гонорея має далекосяжні медичні, соціальні, психологічні і навіть судово-медичні наслідки. Хвороба набула характеру близький до пандемії – за найімовірнішими оцінками щорічно у світі реєструється від 2,5 до 3 мільйонів нових випадків на рік, приблизно 1 випадок кожні 15 секунд. Більше половини випадків становлять підлітки та молоді люди до 25 років. Гоно-рея реєструється не лише серед підлітків, а й серед дітей, які не досягли статевої зрілості. Підозрілими мають бути будь-які виділення з піхви або уретри у дітей.

Хоча співвідношення випадків захворювання у чоловіків і жінок наближається 1:1, зазвичай на одну жінку припадає троє пролікованих чоловіків. Прояви хвороби у чоловіків гостріші і неприємніші, що змушує їх частіше звертатися за медичною допомогою. У жінок хвороба часто протікає безсимптомно або з неяскраво вираженою симптоматикою. У багатьох їх діагноз поставлено лише внаслідок інформації, отриманої від своїх статевих партнерів. «Мовчаючий» резервуар жінок, які безсимптомно хворіють, є первинною перешкодою для контролю захворюваності. Рекомендується обстеження на гонорею розглядати як істотну частину пренатального догляду, а рутинне виділення повинно проводитися частіше під час звичайних гінекологічних обстежень.

Найбільш згубною є інформація, що передається з покоління в покоління, про те, що гонорея не більш небезпечна, ніж нежить. Такий хибний висновок зменшує небезпеку гонореї та створює враження, що «застуда» не супроводжується ускладненнями.

Зазначено, що гонорея є найпоширенішою причиною безпліддя в обох статей. У жінок стерильність обумовлена ​​облітерацією фалопієвих труб рубцевою тканиною, що утворилася при вирішенні гонорейного сальпінгіту. У чоловіків стерильність обумовлена ​​облітерацією насіннєвих проток, викликаної аналогічним процесом гонорейного зараження і вирішенням запального процесу з подальшим рубцюванням.

Гонококки. Імунітет

Захворювання на гонорею майже або взагалі не створює імунітету до наступних випадків зараження. Реакція антитіл слабо виражена. Очевидний дефіцит імунітету може бути головною причиною, чому хвороба залишається ендемічною у людській популяції. Існує виражена чутливість до повторного інфікування. Відносний типоспецифічний імунітет до гонореї зумовлений опсонінами.

Гонококки. Профілактика

Населення слід пояснювати небезпеку гонореї та труднощі її лікування. На жаль, широке використання в побуті хіміопрепаратів і антибіотиків створило враження, що лікування гонореї не становить проблеми. Особливо слід підкреслити небезпеку самолікування, використання народних засобів», звернення до некомпетентних осіб, самозваних «цілителів». Хворі не повинні бруднити туалети виділеннями, і вони повинні бути попереджені про небезпеку занесення інфекції руками у свої очі. Офтальмія новонароджених може запобігти методу Креде. Негайно після народження повіки дитини промиваються стерильною водою. Для промивання кожного ока використовують окремий тампон, яким проводять від носа назовні. Далі повіки розкривають і в кожне око закопують 1-2 краплі 1% розчину нітрату срібла, суворо стежачи за тим, щоб весь кон'юнктивальний мішок був повністю покритий розчином. Через 2 хвилини очі зрошуються ізотонічним сольовим розчином.

Вульвовагініт у дітей може бути запобігти шляхом належної обробки постільної білизни, нічного одягу, води для миття та ванни. Всі діти повинні бути обстежені на гонорею, перш ніж отримають дозвіл на контакт з іншими дітьми в дитячих установах або лікарнях. Лікарі та медперсонал, які використовують гумові або пластикові рукавички для пальпації та обстеження шийки матки та піхви повинні ці рукавички замінити перед пальцевим дослідженням прямої кишки.

У зв'язку з тим, що статевим шляхом передається не тільки гонорея, кожен гонорейний хворий повинен пройти серологічне тестування на сифіліс та ВІЛ-інфекцію.

Гонококова вакцина була отримана шляхом виділення та очищення білка пилок. Її дія полягає в тому, що антитіла, що продукуються реципієнтом, обволікають ворсинки будь-якого гонокока, що проник в організм людини, що перешкоджає фіксації бактерій на клітинах господаря і, тим самим, перешкоджає розвитку захворювання.

Існує гонококова вакцина (гоновакцина), що представляє собою завис інактивованої культури гонококів в 0,9% розчині хлориду натрію. Використовується при діагностиці (встановленні лікування гонореї), і як допоміжний метод лікування при мляво рецидивах, що протікають, при свіжих торпідних і хронічних формах захворювання. Призначається чоловікам з ускладненою і жінкам з висхідною гонореєю (після стихання гострих запальних явищ).

Висновок

2. Гонококи (збудники гонореї) – це диплококи, які можуть бути розташовані всередині та позаклітинно.

3. Нейссерії ростуть лише у атмосфері, що містить 10% СО2, і лише спеціально збагачених середовищах.

4. Пили гонококу є структурою, що забезпечує прикріплення мікроба до циліндричного епітелію слизової оболонки.

5. Гонококи з первинного вогнища інфекції (епітелій уретри, шийки матки, прямої кишки) поширюються на інші відділи організму, зокрема у репродуктивні органи. При зараженнях, що повторюються, відбувається деформація фалопієвих труб, викликана формуванням рубців. Можлива повна непрохідність. У чоловіків утворення рубців призводить до звуження (структурі) уретри.

6. Однією з форм прояву гонококової інфекції дорослих і особливо новонароджених дітей є специфічне гнійне запалення кон'юнктиви. У процес іноді залучаються тканини ока, що може призвести до серйозного порушення зору.

7. Ophthalmia neonatorum - гонококова інфекція, що виникає при проходженні плода через заражений родовий канал. З метою профілактики всім новонародженим у кон'юнктивальний мішок обох очей вводять нітрат срібла (метод Креде).

Нейсерії - грамнегативні аеробні коки, що відносяться до роду Neisseria, що включає 8 видів: Neisseria meningitides, Niesseria gonorrhoeae, N. flava, N. subflava, N. perflava, N. sicca.

Морфологія: нерухомі неспорогенні грамнегативні диплококи, що утворюють капсулу, поліморфні - зустрічаються у вигляді дрібних або великих форм. , можуть змінювати властивості та перетворитися на грампозитивну форму.

Культуральні властивості: аероби, хемоорганотроф; для зростання вимагають свіжоприготовлені вологі середовища з додаванням нативних білків крові, сироватки або асцитичної рідини. Не викликають гемолізу на середовищах, що містять кров; на середовищах з додаванням молока, желатину та картоплі не ростуть. На щільних живильних середовищах через 24год, при вмісті протеїну II утворюють злегка каламутні безбарвні колонії, що не містять його утворюють круглі прозорі колонії у вигляді крапель роси, на рідких живильних середовищах ростуть дифузно і утворюють плівку, яка за кілька годин осідає на дно.

Біохімічна активність: вкрай низька – розкладають лише глюкозу, продукують каталазу та цитохромоксидазу, протеолітична активність відсутня, H2S, аміаку, індолу не утворює.

Антигенна структура: Містить А і К антигени, ЛПС мають сильну імуногенність, основне антигенне навантаження несуть пили і білки мембрани. Зовнішня мембрана містить протеїни І, ІІ, ІІІ класів, що виявляють сильні імуногенні властивості.

Чинники патогенності: капсула, пили, ендотоксин, білки мембрани

Капсула має антифагоцитарну дію. Пили забезпечують адгезію до епітелію. Клітинна стінка містить ендотоксин. Поверхневий білок І класу – забезпечує стійкість до бактерицидних факторів слизових оболонок. Класу II – (протеїни каламутності, ОРА-протеїни) зумовлюють прикріплення до епітелію, перешкоджають фагоцитозу. N. синтезують IgA протеазу, що розщеплює Ig.

Резистентність: дуже нестійкі у навколишньому середовищі, чутливі до дії антисептиків, високочутливі до пеніцилінів, тетрацикліну, стрептоміцину Здатні до утилізації пеніцилінів при покупці бета-лактамаз.

Патогенез: Вхідні ворота- Циліндричний епітелій сечостатевих шляхів. Гонококи прикріплюються до епітелію за допомогою поверхневих білків, викликають загибель і злущування клітин, захоплюються клітинами, де розмножуються, потрапляють на БМ, після чого потрапляють на з'єднування. тканину і викликають запалення чи потрапляють у кров із можливим десимінуванням.

Імунітет – майже відсутня.

Мікробіологічна діагностика:

Бактеріоскопічне дослідження: Матеріалом для дослідження служить гнійне відокремлюване з уретри, піхви, прямої кишки, глотки, сироватки крові. Готують мазки, забарвлення за Грамом, При "+" результаті - виявляють гонококи - грам + диплококи бобовидної форми., знаходяться всередині лейкоцитів. Позитивний діагноз ставиться за гострої форми гонореї до застосування антибіотиків.

Бактеріологічне дослідження. Матеріал засівають на чашки Петрі зі спеціальними поживними середовищами - КДС, сироватковим агаром. Середовище КДС містить поживний агар з додаванням певної концентрації казеїну, дріжджового екстракту і сироватки крові. Посіви інкубують при 37°С протягом 24-72 год. Гонококи утворюють круглі прозорі колонії, що нагадують краплі роси, на відміну від каламутніших колоній стрептококів або пігментованих колоній стафілококів, які також можуть рости на цих середовищах. Підозрільні колонії пересівають у пробірки на відповідні середовища для одержання чистих культур, які ідентифікують за цукролітичними властивостями на середовищах «строкатого» ряду (напіврідкий агар із сироваткою та вуглеводом). Гонококк ферментує тільки глюкозу з утворенням кислоти.

Серодіагностика. У деяких випадках ставлять РСК Борде – Жангу. Як антиген використовують суспензію вбитих гонококів. Реакція Борде-Жангу має допоміжне значення при діагностиці гонореї. Вона позитивна при хронічній та ускладненій гонореї.

Лікування: антибіотикотерапія (пеніцилін, тетрациклін, канаміцин), імунотерапія - Гонококова вакцина - завись гонококів, убитих нагріванням, використовується для вакцинотерапії хронічної гонореї.

Зміст теми "Аеробні грамнегативні коки. Нейссерії. Гонорея. Менінгіт.":









Гонорея. Збудник гонореї. Гонокок. Епідеміологія гонореї. Джерело гонореї. Морфологія гонококів. Тінторіальні властивості гонококів.

Гонорея- інфекційне венеричне захворювання, що проявляється запаленням слизових оболонок переважно сечостатевих шляхів. Гонокок - збудник гонореї, інфекційного венеричного захворювання, що проявляється запаленням слизових переважно сечостатевих шляхів. Термін «гонорея» [від грец. gone, насіння, + (-rirhoia, закінчення] ввів Клавдій Гален у II столітті н.е., хоча захворювання було відомо ще раніше - у вавилонських, ассирійських та грецьких міфах згадується хвороба, що представляє, судячи з клінічної картини, гонорею. час гонорея - одне з найпоширеніших інфекційних захворювань. Збудник гонореї - Neisseria gonorrhoeae (гонокок) - вперше виявлений Найсером у 1879 р.

Гонокок. Епідеміологія гонореї. Джерело гонореї.

Джерело гонореї- хвора людина. Основний шлях зараження гонореєю- статевий, можливе інфікування плода під час проходження через родові шляхи матері. Вроджена несприйнятливість відсутня. Після перенесеного захворювання несприйнятливість до вторинних заражень не виробляється; можливі супер-і реінфекції.

Тварини резистентні до гонококівлише внутрішньочеревне введення мікробів викликає загибель дрібних лабораторних тварин.

Морфологія та тинкторіальні властивості гонореї

У свіжих культурах гонококипредставляють нерухомі диплококи розміром 1,25-1,0x0,7-0,8 мкм, що утворюють капсулу.

Характерний поліморфізм гонококів- у мазках зустрічають відносно дрібні або великі клітини, а також паличкоподібні форми. Добре фарбуються аніліновими барвниками (метиленовим синім, діамантовим зеленим та ін.). Утворюють L-форми, у тому числі під дією пеніциліну. Під впливом хіміопрепаратів швидко змінюють властивості та утворюють грампозитивні форми. Гонококи мають складно організовану клітинну стінку; наявність тих чи інших її компонентів зумовлює їхню внутрішньовидову диференціювання. За наявності пилок гонококи поділяються на п'ять типів (Т1-Т5).

Гонококки типівТ1 і Т2 забезпечені пилками (Р+ та Р++), оточені капсулою та вірулентні, бактерії інших типів вірулентні. Білок 1 становить до 60% речовини клітинної мембраниі його ідентифікація складає основу серотипування гонококів і розпізнавання бактерій методом ІФА. Білок II визначає специфічні клінічні проявизахворювання. Бактерії, що містять білки 1 і II, зазвичай виділяють при ураженнях. сечовивідних шляхів, А штами, що містять білок I, але позбавлені білка І - при дисемінованих ураженнях.