Një nga detyrat më të rëndësishme të kimisë farmaceutike është zhvillimi dhe përmirësimi i metodave për vlerësimin e cilësisë së barnave.

Për të përcaktuar pastërtinë e substancave medicinale, përdoren metoda të ndryshme të analizës fizike, fiziko-kimike, kimike ose një kombinim i tyre.

Fondi Global ofron metodat e mëposhtme për kontrollin e cilësisë së barnave.

Metodat fizike dhe fiziko-kimike. Këto përfshijnë: përcaktimin e temperaturave të shkrirjes dhe ngurtësimit, si dhe kufijtë e temperaturës së distilimit; përcaktimi i densitetit, indeksi i thyerjes (refraktometria), rrotullimi optik (polarimetria); spektrofotometri - ultravjollcë, infra të kuqe; fotokolorimetria, spektrometria e emetimit dhe thithjes atomike, fluorimetria, spektroskopia e rezonancës magnetike bërthamore, spektrometria e masës; kromatografia - adsorbimi, shpërndarja, shkëmbimi i joneve, gazi, lëngu me performancë të lartë; elektroforezë (frontale, zonale, kapilare); metodat elektrometrike (përcaktimi potenciometrik i pH, titrimi potenciometrik, titrimi amperometrik, voltammetria).

Përveç kësaj, është e mundur të përdoren metoda alternative ndaj atyre farmakopeale, të cilat ndonjëherë kanë karakteristika analitike më të avancuara (shpejtësia, saktësia e analizës, automatizimi). Në disa raste, një kompani farmaceutike blen një pajisje bazuar në një metodë që nuk është përfshirë ende në Farmakope (për shembull, metoda e spektroskopisë Raman - dikroizmi optik). Ndonjëherë këshillohet që teknika kromatografike të zëvendësohet me një spektrofotometrike gjatë përcaktimit të autenticitetit ose testimit të pastërtisë. Metoda farmakopeale për përcaktimin e papastërtive të metaleve të rënda me precipitim në formën e sulfideve ose tioacetamideve ka një sërë disavantazhesh. Për të përcaktuar papastërtitë e metaleve të rënda, shumë prodhues po prezantojnë metoda të analizës fizike dhe kimike të tilla si spektrometria e përthithjes atomike dhe spektrometria e emetimit atomik të plazmës së çiftuar në mënyrë induktive.

Një konstante e rëndësishme fizike që karakterizon origjinalitetin dhe shkallën e pastërtisë së një droge është pika e shkrirjes. Një substancë e pastër ka një pikë të veçantë shkrirjeje, e cila ndryshon në prani të papastërtive. Për substancat medicinale që përmbajnë një sasi të caktuar të papastërtive të pranueshme, Fondi Shtetëror rregullon diapazonin e temperaturës së shkrirjes brenda 2 °C. Por në përputhje me ligjin e Raoult (AT = iK3C, ku AT është ulja e temperaturës së kristalizimit; K3 është konstanta krioskopike; C është përqendrimi) në i = 1 (jo elektrolit), vlera e AG nuk mund të jetë e njëjtë për të gjitha substancat. Kjo është për shkak jo vetëm të përmbajtjes së papastërtive, por edhe të natyrës së vetë ilaçit, d.m.th., me vlerën e konstantës krioskopike K3, e cila pasqyron uljen molare të temperaturës së shkrirjes së ilaçit. Kështu, në të njëjtën AT = 2 °C për kamforin (K3 = 40) dhe fenolin (K3 = 7.3), fraksionet masive të papastërtive nuk janë të barabarta dhe janë përkatësisht 0.76 dhe 2.5%.

Për substancat që shkrihen gjatë dekompozimit, zakonisht specifikohet temperatura në të cilën substanca dekompozohet dhe ndodh një ndryshim i mprehtë në pamjen e saj.

Në disa artikuj privatë të Fondit Shtetëror X, rekomandohet të përcaktohet temperatura e ngurtësimit ose pika e vlimit (sipas Fondit Shtetëror XI - "kufijtë e temperaturës së distilimit") për një numër ilaçesh të lëngshme. Pika e vlimit duhet të jetë brenda intervalit të dhënë në artikullin privat.

Një interval më i gjerë tregon praninë e papastërtive.

Shumë artikuj privatë të Fondit Shtetëror X ofrojnë vlera të pranueshme të densitetit dhe më rrallë të viskozitetit, duke konfirmuar vërtetësinë dhe cilësinë e mirë të ilaçit.

Pothuajse të gjithë artikujt privatë të Fondit Global X standardizojnë një tregues të tillë të cilësisë së ilaçit si tretshmëria në tretës të ndryshëm. Prania e papastërtive në një ilaç mund të ndikojë në tretshmërinë e tij, duke e zvogëluar ose rritur atë në varësi të natyrës së papastërtisë.

Kriteret e pastërtisë përfshijnë gjithashtu ngjyrën e barit dhe/ose transparencën e formave të dozimit të lëngshëm.

Një kriter i caktuar për pastërtinë e një medikamenti mund të jenë konstantet fizike të tilla si indeksi i thyerjes së një rreze drite në një tretësirë ​​të substancës testuese (refraktometria) dhe rrotullimi specifik, për shkak të aftësisë së një numri substancash ose tretësirave të tyre për t'u rrotulluar. rrafshi i polarizimit kur drita e polarizuar në rrafsh kalon nëpër to (polarimetria). Metodat për përcaktimin e këtyre konstantave i përkasin metodave optike të analizës dhe përdoren gjithashtu për të përcaktuar origjinalitetin dhe analizën sasiore të barnave dhe formave të tyre të dozimit.

Një kriter i rëndësishëm për cilësinë e mirë të një numri barnash është përmbajtja e tyre në ujë. Një ndryshim në këtë tregues (veçanërisht gjatë ruajtjes) mund të ndryshojë përqendrimin e substancës aktive dhe, rrjedhimisht, aktivitetin farmakologjik dhe ta bëjë ilaçin të papërshtatshëm për përdorim.

Metodat kimike. Këto përfshijnë: reaksionet cilësore për autenticitetin, tretshmërinë, përcaktimin e substancave të avullueshme dhe ujit, përcaktimin e përmbajtjes së azotit në përbërjet organike, metodat titrimetrike (titrimi acido-bazë, titrimi në tretës jo ujorë, kompleksometria), nitritometria, numri acid, numri i saponifikimit , numri i eterit, numri i jodit etj.

Metodat biologjike. Metodat biologjike për kontrollin e cilësisë së barnave janë shumë të ndryshme. Këto përfshijnë teste për toksicitetin, sterilitetin dhe pastërtinë mikrobiologjike.

Për të kryer analiza fiziko-kimike të produkteve të ndërmjetme, substancave të drogës dhe formave të gatshme të dozimit kur kontrolloni cilësinë e tyre për pajtueshmërinë me kërkesat e Ligjit Federal, laboratori i kontrollit dhe analitik duhet të jetë i pajisur me grupin minimal të pajisjeve dhe instrumenteve të mëposhtme:

Spektrofotometri IR (për të përcaktuar vërtetësinë);

spektrofotometër për spektrometrinë në rajonin e dukshëm dhe UV (identifikimi, sasia, uniformiteti i dozës, tretshmëria);

pajisje për kromatografi me shtresë të hollë (TLC) (përcaktimi i autenticitetit, papastërtitë e lidhura);

kromatograf për kromatografi të lëngshme me performancë të lartë (HPLC) (identifikimi, përcaktimi sasior, përcaktimi i papastërtive të lidhura, uniformiteti i dozës, tretshmëria);

kromatograf gaz-lëng (GLC) (përmbajtja e papastërtisë, përcaktimi i uniformitetit të dozimit);

polarimetër (identifikimi, kuantifikimi);

potenciometër (matja e pH, përcaktimi sasior);

spektrofotometër absorbues atomik (analiza elementare e metaleve të rënda dhe jometaleve);

K. Titrator Fischer (përcaktimi i përmbajtjes së ujit);

derivatografi (përcaktimi i humbjes së peshës pas tharjes).

Qëllimi i studimit të substancave medicinale është të vërtetojë përshtatshmërinë e produktit medicinal për përdorim mjekësor, d.m.th. pajtueshmërinë me dokumentin e tij rregullator për këtë bar.

Analiza farmaceutike është shkenca e karakterizimit kimik dhe matjes së substancave biologjikisht aktive në të gjitha fazat e prodhimit: nga kontrolli i lëndëve të para deri te vlerësimi i cilësisë së substancës së ilaçit që rezulton, studimi i qëndrueshmërisë së tij, përcaktimi i datave të skadencës dhe standardizimi i formës së dozimit të përfunduar. Veçoritë e analizës farmaceutike janë shkathtësia e saj dhe shumëllojshmëria e substancave ose përzierjeve të tyre, duke përfshirë substanca kimike individuale, përzierje komplekse të substancave biologjike (proteina, karbohidrate, oligopeptide, etj.). Metodat e analizës kanë nevojë për përmirësim të vazhdueshëm dhe, nëse në farmakopenë e UP-së mbizotërojnë metodat kimike, përfshirë reaksionet cilësore, në fazën e tanishme përdoren kryesisht metoda fiziko-kimike dhe fizike të analizës.

Analiza farmaceutike, në varësi të objektivave, përfshin aspekte të ndryshme të kontrollit të cilësisë së barnave:
1. Analiza farmakopeale;
2. Kontrolli hap pas hapi i prodhimit të barnave;
3. Analiza e barnave të prodhuara individualisht.

Kryesorja dhe më domethënësja është analiza farmakopeale, d.m.th. analiza e produkteve medicinale për pajtueshmëri me standardin - monografi farmakopeale ose ND tjetër dhe, në këtë mënyrë, konfirmimi i përshtatshmërisë së tij. Prandaj kërkesat për specifikë të lartë, selektivitet, saktësi dhe besueshmëri të analizës.

Një përfundim për cilësinë e një produkti medicinal mund të bëhet vetëm në bazë të analizës së një kampioni (kampion statistikisht i besueshëm). Procedura për marrjen e mostrave tregohet ose në një artikull privat ose në artikullin e përgjithshëm të Fondit Shtetëror X1 ed. (çështja 2) fq.15. Për të testuar produktet medicinale për pajtueshmërinë me kërkesat e dokumentacionit rregullator dhe teknik, kryhet kampionimi me shumë faza (mostrat). Në kampionimin me shumë faza, një kampion (kampion) formohet në faza dhe produktet në secilën fazë zgjidhen rastësisht në sasi proporcionale nga njësitë e përzgjedhura në fazën e mëparshme. Numri i fazave përcaktohet nga lloji i paketimit.

Faza e parë: përzgjedhja e njësive të paketimit (kuti, kuti, etj.);
Faza 2: përzgjedhja e njësive të paketimit të vendosura në kontejnerë ambalazhimi (kuti, shishe, kanaçe, etj.);
Faza 3: përzgjedhja e produkteve në paketimin parësor (ampula, shishe, ambalazhe konturore, etj.).

Për të llogaritur zgjedhjen e sasisë së produkteve në çdo fazë, përdorni formulën:

Ku n - numri i njësive të paketimit të kësaj faze.

Procedura specifike për marrjen e mostrave përshkruhet në detaje në botimin e Fondit Global X1, numri 2. Në këtë rast, analiza konsiderohet e besueshme nëse të paktën katër mostra janë të riprodhueshme.

Kriteret e Analizës Farmaceutike

Për qëllime të ndryshme të analizës, kritere të tilla si selektiviteti i analizës, ndjeshmëria, saktësia, koha e analizës dhe sasia e substancës testuese janë të rëndësishme.

Selektiviteti i analizës është thelbësor kur analizohen barna komplekse që përbëhen nga disa përbërës aktivë. Në këtë rast, selektiviteti i analizës për përcaktimin sasior të secilës prej substancave është shumë i rëndësishëm.

Kërkesat për saktësi dhe ndjeshmëri varen nga objekti dhe qëllimi i studimit. Gjatë testimit për pastërti ose papastërti, përdoren metoda shumë të ndjeshme. Për kontrollin e prodhimit hap pas hapi, faktori kohor i shpenzuar në analizë është i rëndësishëm.

Një parametër i rëndësishëm i metodës së analizës është kufiri i ndjeshmërisë së metodës. Ky kufi nënkupton përmbajtjen më të ulët në të cilën një substancë e caktuar mund të zbulohet me besueshmëri. Më pak të ndjeshme janë metodat kimike të analizës dhe reaksionet cilësore. Metodat më të ndjeshme enzimatike dhe biologjike që lejojnë zbulimin e makromolekulave të vetme të substancave. Nga ato që përdoren realisht, më të ndjeshmet janë metodat radiokimike, katalitike dhe fluoreshente, të cilat lejojnë përcaktimin deri në 10 -9%; ndjeshmëria e metodave spektrofotometrike 10 -3 -10 -6%; potenciometrik 10 -2%.

Termi "saktësia analitike" përfshin njëkohësisht dy koncepte: riprodhueshmërinë dhe korrektësinë e rezultateve të marra.

Riprodhueshmëria - karakterizon shpërndarjen e rezultateve të analizës në krahasim me vlerën mesatare.

korrektësi - pasqyron ndryshimin midis përmbajtjes aktuale dhe asaj të gjetur të një substance. Saktësia e analizës varet nga cilësia e instrumenteve, përvoja e analistit etj. Saktësia e analizës nuk mund të jetë më e lartë se saktësia e matjes më pak të saktë. Kjo do të thotë se nëse gjatë titrimit saktësia është ±0,2 ml plus gabimi nga rrjedhja është gjithashtu ±0,2 ml, d.m.th. në total ±0,4 ml, atëherë kur konsumohet 20 ml titran, gabimi është 0,2%. Ndërsa madhësia e kampionit dhe sasia e titrantit zvogëlohen, saktësia zvogëlohet. Kështu, analiza titrimetrike lejon përcaktimin me një gabim relativ prej ± (0,2-0,3)%. Çdo metodë ka saktësinë e vet. Kur analizoni, është e rëndësishme të kuptoni konceptet e mëposhtme:

Gabime të rënda - janë një llogaritje e gabuar e vëzhguesit ose një shkelje e teknikës së analizës. Rezultate të tilla hidhen poshtë si jo të besueshme.

Gabimet sistematike - pasqyrojnë korrektësinë e rezultateve të analizës. Ato shtrembërojnë rezultatet e matjes, zakonisht në një drejtim me një vlerë të caktuar konstante. Gabimet sistematike mund të eliminohen pjesërisht duke futur korrigjime, kalibrim të pajisjes, etj.

Gabime të rastësishme - pasqyrojnë riprodhueshmërinë e rezultateve të analizës. Ato shkaktohen nga variabla të pakontrollueshëm. Mesatarja aritmetike e gabimeve të rastësishme priret në zero. Prandaj, për llogaritjet është e nevojshme të përdoren jo rezultatet e matjeve të vetme, por mesatarja e disa përcaktimeve paralele.

Gabim absolut– paraqet dallimin ndërmjet rezultatit të marrë dhe vlerës së vërtetë. Ky gabim shprehet në të njëjtat njësi me vlerën që përcaktohet.

Gabim relativ përkufizimi është i barabartë me raportin e gabimit absolut me vlerën e vërtetë të sasisë që përcaktohet. Zakonisht shprehet si përqindje ose fraksion.

Vlerat e gabimeve relative varen nga metoda e përdorur për të kryer analizën dhe nga cila është substanca që analizohet - një substancë individuale dhe një përzierje e shumë përbërësve.

Gabimi relativ gjatë studimit të substancave individuale duke përdorur metodën spektrofotometrike është 2-3%, dhe duke përdorur spektrofotometrinë IR - 5-12%; kromatografi e lëngët 3-4%; potenciometria 0,3-1%. Metodat e kombinuara zakonisht zvogëlojnë saktësinë e analizës. Metodat biologjike janë më pak të sakta - gabimi i tyre relativ arrin 50%.

Metodat për identifikimin e substancave medicinale.

Treguesi më i rëndësishëm gjatë testimit të substancave medicinale është identifikimi i tyre ose, siç është zakon në monografitë farmakopeale, autenticiteti i tyre. Metoda të shumta përdoren për të përcaktuar origjinalitetin e substancave medicinale. Të gjitha ato themelore dhe të përgjithshme janë përshkruar në botimin GF X1, numri 1. Historikisht, theksi kryesor ishte te kimikatet, përfshirë. reaksionet cilësore të ngjyrave që karakterizojnë praninë e joneve të caktuara ose grupeve funksionale në përbërjet organike, në të njëjtën kohë, u përdorën gjerësisht edhe metodat fizike; Në farmakopetë moderne, theksi vihet në metodat fiziko-kimike.

Le të përqendrohemi në ato kryesore metoda fizike.

Një konstante mjaft e qëndrueshme që karakterizon një substancë, pastërtia dhe autenticiteti i saj është pika e shkrirjes. Ky tregues përdoret gjerësisht për të standardizuar substancat e drogës. Metodat për përcaktimin e pikës së shkrirjes janë përshkruar në detaje në GF X1, ju mund ta provoni vetë në klasa laboratorike. Një substancë e pastër ka një pikë shkrirjeje konstante, por kur i shtohen papastërti, pika e shkrirjes zakonisht zvogëlohet mjaft ndjeshëm. Ky efekt quhet një mostër përzierjeje dhe është kampioni i përzierjes që lejon njeriun të përcaktojë vërtetësinë e një ilaçi në prani të një kampioni standard ose të një kampioni të njohur. Sidoqoftë, ekzistojnë përjashtime, për shembull, acidi sulfokaforik racemik shkrihet në një temperaturë më të lartë dhe format e ndryshme kristalore të indometacinës ndryshojnë në pikën e tyre të shkrirjes. ato. Kjo metodë është një nga treguesit që na lejon të karakterizojmë si pastërtinë e produktit ashtu edhe origjinalitetin e tij.

Për disa barna, përdoret një tregues si temperatura e ngurtësimit. Një tregues tjetër që karakterizon një substancë është pika e vlimit ose kufijtë e temperaturës së distilimit. Ky tregues karakterizon substanca të lëngshme, për shembull, alkool etilik. Pika e vlimit është një tregues më pak karakteristik, varet shumë nga presioni atmosferik, mundësia e formimit të përzierjeve ose azeotropeve dhe përdoret mjaft rrallë.

Ndër metodat e tjera fizike, vlen të përmendet përcaktimi dendësia, viskoziteti. Metodat standarde të analizës janë përshkruar në GF X1. Një metodë që karakterizon autenticitetin e një ilaçi është gjithashtu përcaktimi i tretshmërisë së tij në tretës të ndryshëm. Sipas GF X1 ed. Kjo metodë karakterizohet si një veti që mund të shërbejë si një karakteristikë treguese e barit që testohet. Së bashku me pikën e shkrirjes, tretshmëria e një substance është një nga parametrat me të cilin përcaktohet origjinaliteti dhe pastërtia e pothuajse të gjitha substancave medicinale. Farmakopeja përcakton një gradim të përafërt të substancave sipas tretshmërisë nga shumë lehtësisht të tretshëm në praktikisht të patretshëm. Në këtë rast, një substancë konsiderohet e tretur nëse nuk vërehen grimca të substancës në tretësirë ​​në dritën e transmetuar.

Metodat fiziko-kimike për përcaktimin e autenticitetit.

Më informuese nga pikëpamja e përcaktimit të autenticitetit të substancave janë metodat fiziko-kimike të bazuara në vetitë e molekulave të substancës për të bashkëvepruar me çdo faktor fizik. Metodat fiziko-kimike përfshijnë:

1. Metodat spektrale
Spektroskopia UV
Spektroskopia e dritës së dukshme
Spektroskopia IR
Spektroskopia e fluoreshencës
Spektroskopia e përthithjes atomike
Metodat e analizës me rreze X
Rezonanca magnetike bërthamore
Analiza e difraksionit me rreze X

2. Metodat e sorbimit të analizës
Kromatografia me shtresë të hollë
Kromatografia gaz-lëng
Kromatografia e lëngshme me performancë të lartë
Elektroforeza
Jontoforeza
Kromatografia me xhel

3. Metodat masive të analizës
Spektrometria e masës
Spektrometria e kromatomasës

4. Metodat elektrokimike të analizës
Polarografia
Rezonanca paramagnetike e elektroneve

5.Përdorimi i mostrave standarde

Le të shqyrtojmë shkurtimisht metodat analitike të aplikueshme në farmaci. Të gjitha këto metoda të analizës do t'ju lexohen në detaje në fund të dhjetorit nga profesori V.I. Për të përcaktuar vërtetësinë e substancave medicinale, përdoren disa metoda spektrale. Më e besueshme është përdorimi i rajonit me frekuencë të ulët të spektroskopisë IR, ku brezat e përthithjes pasqyrojnë në mënyrë më të besueshme një substancë të caktuar. Kjo zonë quhet edhe zona e gjurmëve të gishtërinjve. Si rregull, për të konfirmuar vërtetësinë, përdoret një krahasim i spektrave IR të marra në kushte standarde të kampionit standard dhe kampionit të provës. Koincidenca e të gjitha brezave të përthithjes konfirmon vërtetësinë e barit. Përdorimi i spektroskopisë UV dhe të dukshme është më pak i besueshëm sepse natyra e spektrit nuk është individuale dhe pasqyron vetëm një kromofor të caktuar në strukturën e përbërjes organike. Spektroskopia e përthithjes atomike dhe spektroskopia me rreze X përdoren për të analizuar përbërjet inorganike dhe për të identifikuar elementët kimikë. Rezonanca magnetike bërthamore bën të mundur përcaktimin e strukturës së përbërjeve organike dhe është një metodë e besueshme për konfirmimin e autenticitetit, megjithatë, për shkak të kompleksitetit të instrumenteve dhe kostos së lartë, përdoret shumë rrallë dhe, si rregull, vetëm për qëllime kërkimore. . Spektroskopia e fluoreshencës është e zbatueshme vetëm për një klasë të caktuar substancash që fluoreshenojnë nën ndikimin e rrezatimit UV. Në këtë rast, spektri i fluoreshencës dhe spektri i ngacmimit të fluoreshencës janë mjaft individuale, por varen fuqishëm nga mjedisi në të cilin substanca shpërndahet. Kjo metodë përdoret më shpesh për përcaktimin sasior, veçanërisht të sasive të vogla, pasi është një nga më të ndjeshmet.

Analiza e difraksionit me rreze X është metoda më e besueshme për të konfirmuar strukturën e një substance, ajo lejon që dikush të përcaktojë strukturën e saktë kimike të një substance, megjithatë, ajo thjesht nuk është e përshtatshme për analizën on-line të autenticitetit dhe përdoret ekskluzivisht për; qëllime shkencore.

Metodat e sorbimit të analizës kanë gjetur aplikim shumë të gjerë në analizat farmaceutike. Ato përdoren për të përcaktuar identitetin, praninë e papastërtive dhe sasinë. Do t'ju jepet një leksion në detaje rreth këtyre metodave dhe pajisjeve të përdorura nga Profesor V.I Myagkikh, një përfaqësues rajonal i Shimadzu, një nga prodhuesit kryesorë të pajisjeve kromatografike. Këto metoda bazohen në parimin e absorbimit-desorbimit të substancave në transportues të caktuar në një rrjedhë bartëse. Në varësi të bartësit dhe sorbentit, ato ndahen në kromatografi me shtresë të hollë, kromatografi të lëngshme në kolonë (analitike dhe përgatitore, duke përfshirë HPLC), kromatografi gaz-lëng, filtrim me xhel dhe jontoforezë. Dy metodat e fundit përdoren për të analizuar objekte komplekse proteinike. Një disavantazh i rëndësishëm i metodave është relativiteti i tyre, d.m.th. kromatografia mund të karakterizojë një substancë dhe sasinë e saj vetëm duke krahasuar me një substancë standarde. Sidoqoftë, duhet theksuar si një avantazh i rëndësishëm - besueshmëria e lartë e metodës dhe saktësia, sepse në kromatografi, çdo përzierje duhet të ndahet në substanca individuale dhe rezultati i analizës është pikërisht substanca individuale.

Metodat e masës spektrometrike dhe elektrokimike përdoren rrallë për të konfirmuar vërtetësinë.

Një vend të veçantë zënë metodat për përcaktimin e autenticitetit në krahasim me një mostër standarde. Kjo metodë përdoret mjaft gjerësisht në farmakopetë e huaja për të përcaktuar vërtetësinë e makromolekulave komplekse, antibiotikëve kompleksë, disa vitaminave dhe substancave të tjera që përmbajnë veçanërisht atome karboni kiral, pasi përcaktimi i autenticitetit të një substance optike aktive me metoda të tjera është i vështirë ose madje i pamundur. Një material referencë duhet të zhvillohet dhe të lëshohet në bazë të një monografie farmakopeale të zhvilluar dhe të miratuar. Në Rusi, ekzistojnë dhe përdoren vetëm disa mostra standarde, dhe më shpesh përdoren të ashtuquajturat RSO për analiza - mostra standarde pune të përgatitura menjëherë para eksperimentit nga substanca të njohura ose substanca përkatëse.

Metodat kimike të vërtetimit.

Përcaktimi i autenticitetit të substancave medicinale me metoda kimike përdoret kryesisht për substancat medicinale inorganike, sepse Shpesh nuk ka metoda të tjera ose kërkojnë pajisje komplekse dhe të shtrenjta. Siç është përmendur tashmë, elementët inorganikë identifikohen lehtësisht nga thithja atomike ose spektroskopia me rreze X. Monografitë tona farmakopeale zakonisht përdorin metoda kimike të vërtetimit. Këto metoda zakonisht ndahen në këto:

Reaksionet e precipitimit të anioneve dhe kationeve. Shembuj tipikë janë reaksionet e precipitimit të joneve të natriumit dhe kaliumit me (zinkuranil acetat dhe acid tartarik), përkatësisht:

Ka shumë reaksione të tilla të përdorura dhe ato do të diskutohen në detaje në një seksion të veçantë të kimisë farmaceutike në lidhje me substancat inorganike.

Reaksionet redoks.

Reaksionet redoks përdoren për të reduktuar metalet nga oksidet. Për shembull, argjendi nga oksidi i tij formaldehid (reagimi i pasqyrës së argjendit):

Reaksioni i oksidimit të difenilaminës është baza për testimin e origjinalitetit të nitrateve dhe nitriteve:

Reaksionet e neutralizimit dhe zbërthimit të anioneve.

Karbonatet dhe bikarbonatet, nën ndikimin e acideve minerale, formojnë acidin karbonik, i cili zbërthehet në dioksid karboni:

Nitritet, tiosulfatet dhe kripërat e amonit dekompozohen në mënyrë të ngjashme.

Ndryshimet në ngjyrën e flakës pa ngjyrë. Kripërat e natriumit e ngjyrosin flakën në të verdhë, jeshile bakri, vjollcë kaliumi, tullë kalciumi të kuqe. Është ky parim që përdoret në spektroskopinë e përthithjes atomike.

Zbërthimi i substancave gjatë pirolizës. Metoda përdoret për përgatitjet e jodit, arsenikut dhe merkurit. Nga ato që përdoren aktualisht, reaksioni më karakteristik është nitrati bazë i bismutit, i cili, kur nxehet, dekompozohet për të formuar oksidet e azotit:

Identifikimi i substancave medicinale organoelement.

Analiza cilësore elementare përdoret për të identifikuar komponimet që përmbajnë arsenik, squfur, bismut, merkur, fosfor dhe halogjene në një molekulë organike. Meqenëse atomet e këtyre elementeve nuk janë të jonizuar, përdoret mineralizimi paraprak për identifikimin e tyre, ose me pirolizë ose, përsëri, me pirolizë me acid sulfurik. Squfuri përcaktohet nga sulfuri i hidrogjenit nga reaksioni me nitroprusid kaliumi ose kripëra plumbi. Jodi përcaktohet gjithashtu nga piroliza për të çliruar jodin elementar. Nga të gjitha këto reagime, identifikimi i arsenikut është me interes, jo aq si një ilaç - ato praktikisht nuk përdoren, por si një metodë e kontrollit të papastërtive, por më shumë për këtë më vonë.

Testimi i autenticitetit të substancave medicinale organike. Reaksionet kimike të përdorura për të testuar autenticitetin e substancave medicinale organike mund të ndahen në tre grupe kryesore:
1. Reaksionet e përgjithshme kimike të përbërjeve organike;
2. Reaksionet e formimit të kripërave dhe komponimeve komplekse;
3.Reaksionet e përdorura për të identifikuar bazat organike dhe kripërat e tyre.

Të gjitha këto reagime bazohen në fund të fundit në parimet e analizës funksionale, d.m.th. qendra reaktive e molekulës, e cila, kur reagon, jep përgjigjen përkatëse. Më shpesh, ky është një ndryshim në çdo veti të një substance: ngjyra, tretshmëria, gjendja e grumbullimit, etj.

Le të shohim disa shembuj të përdorimit të reaksioneve kimike për të identifikuar substancat medicinale.

1. Reaksionet e nitrimit dhe nitrozimit. Ato përdoren mjaft rrallë, për shembull, për të identifikuar fenobarbitalin, fenacetinën, dikainë, megjithëse këto barna pothuajse nuk përdoren kurrë në praktikën mjekësore.

2. Reaksionet e diazotizimit dhe bashkimit të azotit. Këto reaksione përdoren për të hapur aminat primare. Amina e diazotizuar kombinohet me beta-naftol për të prodhuar një ngjyrë karakteristike të kuqe ose portokalli.

3. Reaksionet e halogjenimit. Përdoret për hapjen e lidhjeve dyfishe alifatike - kur shtohet uji me brom, brom i shtohet lidhjes dyfishe dhe tretësira bëhet e pangjyrë. Një reagim karakteristik i anilinës dhe fenolit është se kur ato trajtohen me ujë bromi, formohet një derivat tribromo, i cili precipiton.

4. Reaksionet e kondensimit të përbërjeve karbonil. Reagimi përfshin kondensimin e aldehideve dhe ketoneve me aminat primare, hidroksilaminë, hidrazinat dhe gjysmëkarbazidet:

Azometinat që rezultojnë (ose bazat Schiff) kanë një ngjyrë karakteristike të verdhë. Reagimi përdoret për të identifikuar, për shembull, sulfonamide. Si aldehid përdoret 4-dimetilaminobenzaldehidi.

5. Reaksionet e kondensimit oksidativ. Procesi i ndarjes oksidative dhe formimit të bojës azometinike qëndron në themel reaksioni i ninhidrinës. Ky reaksion përdoret gjerësisht për zbulimin dhe përcaktimin fotokolorimetrik të α- dhe β-aminoacideve, në prani të të cilave shfaqet një ngjyrë blu e errët intensive. Shkaktohet nga formimi i një kripe të zëvendësuar të diketohydrinylidene diketohydramine, një produkt kondensimi i ninhidrinës së tepërt dhe ninhidrinës së reduktuar me amoniak të çliruar gjatë oksidimit të aminoacidit të testuar:

Për të zbuluar fenolet, përdoret reaksioni i formimit të ngjyrave të triarilmetanit. Pra, fenolet ndërveprojnë me formaldehidin për të formuar ngjyra. Reaksione të ngjashme përfshijnë ndërveprimin e resorcinolit me anhidrit ftalik që çon në formimin e një ngjyre fluoreshente - fluorescein.

Përdoren edhe shumë reaksione të tjera.

Me interes të veçantë janë reagimet me formimin e kripërave dhe komplekseve. Kripërat inorganike të hekurit (III), bakrit (II), argjendit, kobaltit, merkurit (II) dhe të tjera për testimin e autenticitetit të përbërjeve organike: acidet karboksilike, duke përfshirë aminoacidet, derivatet e acidit barbiturik, fenolet, sulfonamidet, disa alkaloide. Formimi i kripërave dhe komponimeve komplekse ndodh sipas skemës së përgjithshme:

R-COOH + MX = R-COOM + HX

Kompleksimi i amineve vazhdon në mënyrë të ngjashme:

R-NH 2 + X = R-NH 2 ·X

Një nga reagentët më të zakonshëm në analizat farmaceutike është një zgjidhje e klorurit të hekurit (III). Duke ndërvepruar me fenolet, ajo formon një zgjidhje me ngjyrë të fenoksideve, ato janë me ngjyrë blu ose vjollcë. Ky reagim përdoret për të zbuluar fenolin ose resorcinolin. Megjithatë, fenolet e meta-zëvendësuara nuk formojnë komponime me ngjyrë (timol).

Kripërat e bakrit formojnë komponime komplekse me sulfonamide, kripërat e kobaltit me barbiturate. Shumë nga këto reagime përdoren gjithashtu për përcaktimin sasior.

Identifikimi i bazave organike dhe kripërave të tyre. Ky grup metodash përdoret më shpesh në forma të gatshme, veçanërisht në studimet e zgjidhjeve. Kështu, kripërat e amineve organike, kur shtohen alkalet, formojnë një precipitat të një baze (për shembull, një zgjidhje e hidroklorurit të papaverinës), dhe anasjelltas, kripërat e acideve organike, kur shtojnë një acid mineral, formojnë një precipitat të një përbërjeje organike. (për shembull, salicilat natriumi). Për të identifikuar bazat organike dhe kripërat e tyre, përdoren gjerësisht të ashtuquajturat reagjentë të precipitimit. Janë të njohura më shumë se 200 reagentë të reshjeve që formojnë kripëra të thjeshta ose komplekse të patretshme në ujë me përbërje organike. Zgjidhjet më të përdorura janë dhënë në vëllimin e dytë të edicionit të 11-të të Fondit Global. Shembujt përfshijnë:
Reagenti i Scheibler - acid fosfotungstik;
Acidi pikrik
Acidi stifnik
Acidi pikramik

Të gjithë këta reagentë përdoren për precipitimin e bazave organike (për shembull, nitroxoline).

Duhet të theksohet se të gjitha këto reaksione kimike përdoren për të identifikuar substancat medicinale jo më vete, por në kombinim me metoda të tjera, më së shpeshti fiziko-kimike, si kromatografia dhe spektroskopia. Në përgjithësi, është e nevojshme t'i kushtohet vëmendje se problemi i origjinalitetit të substancave medicinale është kyç, sepse Ky fakt përcakton padëmshmërinë, sigurinë dhe efektivitetin e ilaçit, prandaj, vëmendje e madhe duhet t'i kushtohet këtij treguesi dhe konfirmimi i origjinalitetit të substancës me një metodë nuk mjafton.

Kërkesat e përgjithshme për testet e pastërtisë.

Një tregues tjetër po aq i rëndësishëm i cilësisë së një ilaçi është pastërtia. Të gjitha barnat, pavarësisht nga mënyra e përgatitjes së tyre, testohen për pastërti. Në këtë rast, përcaktohet përmbajtja e papastërtive në ilaç. Papastërtitë mund të ndahen përafërsisht në dy grupe: së pari, papastërtitë që kanë efekt farmakologjik në organizëm; së dyti, papastërtitë, që tregojnë shkallën e pastrimit të substancës. Këto të fundit nuk ndikojnë në cilësinë e barit, por në sasi të mëdha zvogëlojnë dozën e tij dhe, në përputhje me rrethanat, zvogëlojnë aktivitetin e ilaçit. Prandaj, të gjitha farmakopetë vendosin kufij të caktuar për këto papastërti në produktet medicinale. Pra, kriteri kryesor për cilësinë e mirë të një ilaçi është mungesa e papastërtive, gjë që është e pamundur për nga natyra. Koncepti i mungesës së papastërtive shoqërohet me kufirin e zbulimit të një ose një metode tjetër.

Vetitë fizike dhe kimike të substancave dhe tretësirat e tyre japin një ide të përafërt të pranisë së papastërtive në produktet medicinale dhe rregullojnë përshtatshmërinë e tyre për përdorim. Prandaj, për të vlerësuar cilësinë e mirë, së bashku me përcaktimin e autenticitetit dhe përcaktimin e përmbajtjes sasiore, kryhen një sërë testesh fizike dhe kimike për të konfirmuar shkallën e pastërtisë së tij:

Transparenca dhe turbullira përcaktohet nga krahasimi me një standard të turbulltësisë dhe qartësia përcaktohet nga krahasimi me një tretës.

Chroma. Një ndryshim në shkallën e ngjyrës mund të jetë për shkak të:
a) prania e papastërtive me ngjyrë të huaj;
b) një ndryshim kimik në vetë substancën (oksidimi, ndërveprimi me Me +3 dhe +2, ose procese të tjera kimike që ndodhin me formimin e produkteve me ngjyrë. Për shembull:

Resorcinoli kthehet në të verdhë gjatë ruajtjes për shkak të oksidimit nën ndikimin e oksigjenit atmosferik për të formuar kinone. Në prani, për shembull, të kripërave të hekurit, acidi salicilik merr një ngjyrë vjollce për shkak të formimit të salicilateve të hekurit.

Vlerësimi i ngjyrës kryhet bazuar në rezultatet e krahasimit të eksperimentit kryesor me standardet e ngjyrave, dhe pangjyrësia përcaktohet nga krahasimi me një tretës.

Shumë shpesh, një test i bazuar në ndërveprimin e tyre me acidin sulfurik të përqendruar, i cili mund të veprojë si një agjent oksidues ose agjent dehidratues, përdoret për të zbuluar papastërtitë e substancave organike. Si rezultat i reagimeve të tilla, formohen produkte me ngjyrë. Intensiteti i ngjyrës që rezulton nuk duhet të kalojë standardin përkatës të ngjyrave.

Përcaktimi i shkallës së bardhësisë së barnave pluhur– një metodë fizike e përfshirë për herë të parë në Fondin Shtetëror X1. Shkalla e bardhësisë (hija) e substancave të ngurta medicinale mund të vlerësohet me metoda të ndryshme instrumentale bazuar në karakteristikat spektrale të dritës së reflektuar nga kampioni. Për ta bërë këtë, përdoren koeficientët e reflektimit kur ndriçohet kampioni me dritë të bardhë të marrë nga një burim i veçantë, me një shpërndarje spektrale ose të kaluar përmes filtrave të dritës (me një transmetim maksimal prej 614 nm (e kuqe) ose 439 nm (blu)). Ju gjithashtu mund të matni reflektimin e dritës së kaluar përmes një filtri jeshil.

Një vlerësim më i saktë i bardhësisë së substancave medicinale mund të kryhet duke përdorur spektrofotometra reflektues. Vlera e shkallës së bardhësisë dhe shkalla e shkëlqimit janë karakteristika të cilësisë së të bardhëve dhe të bardhëve me nuanca mjekësore. Kufijtë e tyre të lejuar rregullohen në artikuj privatë.

Përcaktimi i aciditetit, alkalinitetit, pH.

Ndryshimi në këta tregues është për shkak të:
a) një ndryshim në strukturën kimike të vetë substancës medicinale:

b) ndërveprimi i ilaçit me kontejnerin, për shembull, tejkalimi i kufijve të lejuar të alkalinitetit në tretësirën e novokainës për shkak të shpëlarjes së qelqit;
c) thithjen e produkteve të gazta (CO 2, NH 3) nga atmosfera.

Përcaktimi i cilësisë së barnave bazuar në këta tregues kryhet në disa mënyra:

a) duke ndryshuar ngjyrën e treguesit, për shembull, përzierja e acideve minerale në acid borik përcaktohet nga e kuqja metil, e cila nuk e ndryshon ngjyrën e saj nga veprimi i acidit borik të dobët, por bëhet rozë nëse përmban papastërti minerali acidet.

b) metoda titrimetrike - për shembull, për të vendosur kufirin e lejuar për përmbajtjen e acidit hidrojodik të formuar gjatë ruajtjes së një zgjidhjeje alkooli 10% të I 2, titrimi kryhet me alkali (jo më shumë se 0,3 ml 0,1 mol/l NaOH sipas vëllimit të titrantit). (Tretësira e formaldehidit - e titruar me alkali në prani të fenolftaleinës).

Në disa raste, GF vendos vëllimin e titrantit për të përcaktuar aciditetin ose alkalinitetin.

Ndonjëherë dy solucione të titruara shtohen në mënyrë sekuenciale: fillimisht një acid dhe më pas një alkali.

c) duke përcaktuar vlerën e pH - për një numër ilaçesh (dhe domosdoshmërisht për të gjitha solucionet e injektimit), sipas NTD sigurohet përcaktimi i vlerës së pH.

Teknikat për përgatitjen e një lënde gjatë studimit të aciditetit, alkalinitetit, pH

1. Përgatitja e një solucioni me një përqendrim të caktuar të specifikuar në dokumentacionin teknik (për substancat e tretshme në ujë)
2. Për ato të patretshme në ujë, përgatitni një suspension me një përqendrim të caktuar dhe përcaktoni vetitë acido-bazike të filtratit.
3. Për preparatet e lëngëta që nuk përzihen me ujë, tundeni me ujë, pastaj ndani shtresën ujore dhe përcaktoni vetitë e saj acido-bazike.
4. Për lëndët e ngurta dhe lëngjet e patretshme, përcaktimi mund të kryhet drejtpërdrejt në suspension (ZnO)

Vlera e pH përafërsisht (deri në 0,3 njësi) mund të përcaktohet duke përdorur letër tregues ose një tregues universal.

Metoda kolorimetrike bazohet në vetinë e treguesve për të ndryshuar ngjyrën e tyre në intervale të caktuara pH. Për kryerjen e testeve përdoren tretësira tampon me përqendrim konstant të joneve të hidrogjenit, që ndryshojnë nga njëra-tjetra me një vlerë pH prej 0,2. E njëjta sasi (2-3 pika) treguesi shtohet në një sërë zgjidhjesh të tilla dhe në tretësirën e testimit. Duke përputhur ngjyrën me një nga tretësirat buferike, vlerësohet vlera e pH-së së tretësirës së provës.

Përcaktimi i substancave të avullueshme dhe ujit.

Substancat e paqëndrueshme mund të hyjnë në barna ose si rezultat i pastrimit të dobët nga tretës ose ndërmjetës, ose si rezultat i akumulimit të produkteve të dekompozimit. Uji në një substancë medicinale mund të përmbahet në formën e kapilarëve, të lidhur me absorbim, të lidhur kimikisht (hidrat dhe kristalin) ose të lirë.

Për përcaktimin e substancave të paqëndrueshme dhe ujit, përdoren metodat e tharjes, distilimit dhe titrimit me tretësirë ​​Fischer.

Metoda e tharjes. Metoda përdoret për të përcaktuar humbjen e peshës gjatë tharjes. Humbjet mund të jenë për shkak të përmbajtjes së lagështisë higroskopike dhe substancave të paqëndrueshme në substancë. Thajeni në një shishe në peshë konstante në një temperaturë të caktuar. Më shpesh, substanca mbahet në një temperaturë prej 100-105 ºС, por kushtet për tharjen dhe sjelljen në masë konstante mund të jenë të ndryshme.

Përcaktimi i substancave të avullueshme mund të kryhet për disa produkte me kalcinim. Substanca nxehet në një kavanoz derisa substancat e paqëndrueshme të hiqen plotësisht. pastaj rriteni gradualisht temperaturën derisa të kalcinohet plotësisht në nxehtësi të kuqe. Për shembull, GFC rregullon përcaktimin e papastërtive të karbonatit të natriumit në substancën medicinale bikarbonat natriumi me metodën e kalcinimit. Bikarbonati i natriumit zbërthehet në karbonat natriumi, dioksid karboni dhe ujë:

Teorikisht, humbja e peshës është 36.9%. Sipas GFC, humbja e peshës duhet të jetë së paku 36.6%. Dallimi midis humbjes teorike dhe masës të treguar në GPC përcakton kufirin e lejuar për papastërtitë e karbonatit të natriumit në substancë.

Metoda e distilimit në GF 11 quhet "Përcaktimi i ujit", ju lejon të përcaktoni ujin higroskopik. Kjo metodë bazohet në vetinë fizike të avujve të dy lëngjeve të papërziershme. Një përzierje e ujit dhe një tretës organik distilohet në një temperaturë më të ulët se secili lëng. GPC1 rekomandon përdorimin e toluenit ose ksilenit si një tretës organik. Përmbajtja e ujit në substancën e provës përcaktohet nga vëllimi i tij në marrës pas përfundimit të procesit të distilimit.

Titrimi me reagent Fischer. Metoda ju lejon të përcaktoni përmbajtjen totale të ujit hidratuar të lirë dhe kristalor në substanca dhe tretës organikë dhe inorganikë. Avantazhi i kësaj metode është shpejtësia dhe selektiviteti i saj në lidhje me ujin. Tretësira e Fischer është një zgjidhje e dioksidit të squfurit, jodit dhe piridinës në metanol. Disavantazhet e metodës, përveç nevojës për respektim të rreptë të ngushtësisë, përfshijnë pamundësinë për të përcaktuar ujin në prani të substancave që reagojnë me përbërësit e reagentit.

Përkufizimi i hirit.

Përmbajtja e hirit shkaktohet nga papastërtitë minerale që shfaqen në substancat organike gjatë procesit të marrjes së materialeve dhe pajisjeve ndihmëse (kryesisht kationet metalike) nga produktet fillestare, d.m.th. karakterizon praninë e papastërtive inorganike në substancat organike.

A) Hiri total– e përcaktuar nga rezultatet e djegies (hirja, mineralizimi) në temperaturë të lartë, karakterizon shumën e të gjitha substancave të papastërtive inorganike.

Përbërja e hirit:
Karbonatet: CaCO 3, Na 2 CO 3, K 2 CO 3, PbCO 3
Oksidet: CaO, PbO
Sulfatet: CaSO 4
Kloruret: CaCl 2
Nitratet: NaNO 3

Kur merren medikamente nga materialet bimore, papastërtitë minerale mund të shkaktohen nga kontaminimi i bimëve me pluhur, thithja e mikroelementeve dhe komponimeve inorganike nga toka, uji, etj.

b) Hiri, i patretshëm në acid klorhidrik, e përftuar pas trajtimit të hirit total me HCl të holluar. Përbërja kimike e hirit është kloruret e metaleve të rënda (AgCl, HgCl 2, Hg 2 Cl 2), d.m.th. papastërti shumë toksike.

V) Hiri i sulfatuar– Hiri sulfat përcaktohet kur vlerësohet cilësia e mirë e shumë substancave organike. Karakterizon papastërtitë Mn +n në një formë të qëndrueshme sulfate. Hiri sulfat që rezulton (Fe 3 (SO 4) 2, PbSO 4, CaSO 4) përdoret për përcaktimin e mëvonshëm të papastërtive të metaleve të rënda.

Papastërtitë e joneve inorganike – С1 –, SO 4 -2, NН 4 +, Ca +2, Fe +3(+2), Рв +2, Аs +3(+5)

Papastërti të papranueshme:
a) papastërtitë toksike (papastërti CN në jod),
b) që kanë një efekt antagonist (Na dhe K, Mg dhe Ca)

Mungesa e papastërtive që nuk lejohen në substancën medicinale përcaktohet nga një reagim negativ me reagentët përkatës. Në këtë rast, bëhet krahasimi me një pjesë të tretësirës së cilës i janë shtuar të gjithë reagentët, përveç atij kryesor që hap këtë papastërti (eksperiment kontrolli). Një reagim pozitiv tregon praninë e një papastërtie dhe cilësinë e dobët të ilaçit.

papastërtitë e pranueshme - papastërtitë që nuk ndikojnë në efektin farmakologjik dhe përmbajtja e të cilave lejohet në sasi të vogla të përcaktuara nga rregulloret normative dhe teknike.

Për të vendosur kufirin e lejuar për përmbajtjen e papastërtive të joneve në ilaçe, përdoren zgjidhje standarde që përmbajnë jonin përkatës në një përqendrim të caktuar.

Disa substanca medicinale testohen për praninë e papastërtive me anë të titrimit, për shembull, përcaktimi i papastërtisë së norsulfazolit në ilaçin ftalazol. Papastërtia e norsulfazolit në ftalazol përcaktohet në mënyrë sasiore me anë të nitritometrisë. Për të titruar 1 g ftalazol, duhet të konsumohet jo më shumë se 0,2 ml 0,1 mol/l NaNO2.

Kërkesat e përgjithshme për reaksionet që përdoren gjatë testimit për papastërti të pranueshme dhe të papranueshme:
1. ndjeshmëria,
2. specifika,
3. riprodhueshmëria e reaksionit të përdorur.

Rezultatet e reaksioneve që ndodhin me formimin e produkteve me ngjyrë vërehen në dritën e reflektuar në një sfond të bardhë mat, dhe precipitimet e bardha në formën e turbullirës dhe opalescencës vërehen në dritën e transmetuar në një sfond të zi.

Metodat instrumentale për përcaktimin e papastërtive.

Me zhvillimin e metodave analitike, kërkesat për pastërtinë e substancave medicinale dhe format e dozimit janë vazhdimisht në rritje. Në farmakopetë moderne, krahas metodave të diskutuara, përdoren metoda të ndryshme instrumentale, të bazuara në vetitë fiziko-kimike, kimike dhe fizike të substancave. Përdorimi i spektroskopisë UV dhe të dukshme rrallë jep rezultate pozitive dhe kjo për faktin se struktura e papastërtive, veçanërisht e barnave organike, zakonisht është Pranë strukturës së vetë ilaçit, prandaj spektrat e përthithjes ndryshojnë pak, dhe përqendrimi i papastërtisë është zakonisht dhjetëra herë më i ulët se substanca kryesore, gjë që i bën metodat e analizës diferenciale me pak përdorim dhe lejon që papastërtia të vlerësohet vetëm afërsisht. , d.m.th., siç quhet zakonisht gjysmë sasiore. Rezultatet janë disi më të mira nëse njëra nga substancat, veçanërisht papastërtia, formon një përbërje komplekse, dhe tjetra jo, atëherë maksimumi i spektrave ndryshojnë ndjeshëm dhe tashmë është e mundur të përcaktohen papastërtitë në mënyrë sasiore.

Vitet e fundit, pajisjet IR-Fourier janë shfaqur në ndërmarrje, duke bërë të mundur përcaktimin e përmbajtjes së substancës kryesore dhe papastërtive, veçanërisht ujit, pa shkatërruar mostrën, por përdorimi i tyre pengohet nga kostoja e lartë e pajisjeve dhe mungesa e metodave të standardizuara të analizës.

Rezultate të shkëlqyera në përcaktimin e papastërtive janë të mundshme kur papastërtia fluorescon nën ndikimin e rrezatimit UV. Saktësia e analizave të tilla është shumë e lartë, po ashtu edhe ndjeshmëria e tyre.

Përdoret gjerësisht për testimin e pastërtisë dhe përcaktimit sasior të papastërtive si në substancat (substancat) medicinale dhe në format e dozimit, gjë që ndoshta nuk është më pak e rëndësishme, sepse Gjatë ruajtjes së barnave formohen shumë papastërti, të marra me metoda kromatografike: HPLC, TLC, GLC.

Këto metoda bëjnë të mundur përcaktimin e papastërtive në mënyrë sasiore, dhe secilës prej papastërtive individualisht, ndryshe nga metodat e tjera. Metodat e kromatografisë HPLC dhe GLC do të diskutohen në detaje në ligjëratën e Prof. Myagkikh V.I. Ne do të fokusohemi vetëm në kromatografinë me shtresë të hollë. Metoda e kromatografisë me shtresë të hollë u zbulua nga shkencëtari rus Tsvet dhe fillimisht ekzistonte si kromatografi në letër. Kromatografia me shtresë të hollë (TLC) bazohet në ndryshimin në shpejtësinë e lëvizjes së përbërësve të përzierjes së analizuar në një shtresë të hollë të sheshtë sorbent kur një tretës (eluent) lëviz nëpër të. Sorbentët janë xhel silicë, oksid alumini dhe celulozë. Poliamidi, eluentët janë tretës organikë të polariteteve të ndryshme ose përzierjet e tyre me njëri-tjetrin dhe ndonjëherë me tretësirë ​​acidesh ose alkalesh dhe kripërash. Mekanizmi i ndarjes përcaktohet nga koeficientët e shpërndarjes midis sorbentit dhe fazës së lëngshme të substancës në studim, e cila nga ana tjetër shoqërohet me shumë, duke përfshirë vetitë kimike dhe fiziko-kimike të substancave.

Në TLC, sipërfaqja e një pllake alumini ose qelqi është e veshur me një suspension sorbent, thahet në ajër dhe aktivizohet për të hequr gjurmët e tretësit (lagështisë). Në praktikë, zakonisht përdoren pllaka industriale me një shtresë fikse sorbent. Pika të tretësirës së analizuar me vëllim 1-10 μl aplikohen në shtresën sorbente. Skaji i pllakës është zhytur në një tretës. Eksperimenti kryhet në një dhomë të veçantë - një enë qelqi e mbyllur me kapak. Tretësi lëviz nëpër shtresë nën veprimin e forcave kapilare. Është e mundur ndarja e njëkohshme e disa përzierjeve të ndryshme. Për të rritur efikasitetin e ndarjes, përdorni elucione të shumta ose në një drejtim pingul me eluent të njëjtë ose të ndryshëm.

Pas përfundimit të procesit, pllaka thahet në ajër dhe pozicioni i zonave kromatografike të përbërësve përcaktohet në mënyra të ndryshme, për shembull, me rrezatim me rrezatim UV, spërkatje me reagjentë ngjyrues dhe mbahet në avull jodi. Në figurën e shpërndarjes (kromatogram) që rezulton, zonat kromatografike të përbërësve të përzierjes janë të vendosura në formën e pikave në përputhje me thithjen e tyre në një sistem të caktuar.

Pozicioni i zonave kromatografike në kromatogram karakterizohet nga vlera e Rf. i cili është i barabartë me raportin e rrugës l i të përshkuar nga komponenti i-të nga pika e fillimit në rrugën Vп R f = l i / l.

Vlera e R f varet nga koeficienti i shpërndarjes (adsorbimit) K i dhe raporti i vëllimeve të fazave të lëvizshme (V p) dhe stacionare (V n).

Ndarja në TLC ndikohet nga një sërë faktorësh - përbërja dhe vetitë e eluentit, natyra, dispersioni dhe poroziteti i sorbentit, temperatura, lagështia, madhësia dhe trashësia e shtresës së sorbentit dhe dimensionet e dhomës. Standardizimi i kushteve eksperimentale bën të mundur vendosjen e Rf me një devijim standard relativ prej 0.03.

Identifikimi i përbërësve të përzierjes kryhet me vlerat R f. Përcaktimi sasior i substancave në zona mund të kryhet drejtpërdrejt në shtresën e sorbentit nga zona e zonës kromatografike, intensiteti i fluoreshencës së përbërësit ose lidhja e tij me një reagent të përshtatshëm ose me metoda radiokimike. Instrumentet automatike të skanimit përdoren gjithashtu për të matur thithjen, transmetimin, reflektimin e dritës ose radioaktivitetin e zonave kromatografike. Zonat e ndara mund të hiqen nga pllaka së bashku me shtresën e sorbentit, përbërësi mund të desorbohet në tretës dhe tretësira mund të analizohet në mënyrë spektrofotometrike. Duke përdorur TLC, është e mundur të përcaktohen substanca në sasi nga 10 -9 në 10 -6; gabimi i përcaktimit është të paktën 5-10%.

INSTITUCIONI ARSIMOR SHTETËROR I ARSIMIT TË LARTË PROFESIONAL

“UNIVERSITETI MJEKËSOR SHTETËROR SIBERI I AGJENCISË FEDERALE PËR SHËNDETËSIN DHE ZHVILLIMIN SOCIALE”

E.A. Krasnov, A.A. Blinnikova

METODAT FIZIKE DHE KIMIKE NË ANALIZËN E BARNAVE

TUTORIAL

UDC 543.544.1:615.074

BBK G472+ R282

Krasnov E.A., Blinnikova A.A., Metodat fiziko-kimike në analizën e ilaçeve: Libër mësuesi. – Tomsk, 2011. – 168 f.

Teksti shkollor shqyrton bazat teorike, instrumentet dhe aftësitë analitike të metodave fiziko-kimike të përdorura gjerësisht në analizat farmaceutike. Përshkruhen shembuj të përdorimit të GLC, HPLC, spektrofotometrisë, refraktometrisë, polarimetrisë për të përcaktuar identitetin, testin për pastërtinë dhe sasinë e barnave. Janë dhënë pyetje për vetë-përgatitje dhe detyra testimi bazuar në metodat e specifikuara.

Teksti shkollor është i destinuar për studentët që studiojnë në specialitetin e farmacisë (kurs me korrespondencë).

Tabela 8. Il.35. Bibliografi 6 tituj

Rishikuesit:

Shef i Departamentit të Kimisë Farmaceutike me një kurs në Toksikologji

BN5-98591-019-9 © E.A Krasnov, A.A., 2010

© Universiteti Shtetëror Mjekësor Siberian, 2010

Lista e shkurtesave

PC – kromatografi letre HPLC – kromatografi e lëngshme me performancë të lartë GLC – kromatografi gaz-lëng

GSO - mostra standarde shtetërore GF - farmakopea shtetërore KH - kromatografia e kolonës ND - dokumenti normativ NZD - faza e lëngshme stacionare NF - faza stacionare

NPC – kromatografia e fazës normale RPh – kromatografia me fazë të kundërt PGP – faza e lëvizshme e gazit PT – titrimi potenciometrik PF – faza e lëvizshme

RSO - mostra referencë pune SOWS - mostër standarde e substancës dëshmitare TLC - kromatografi me shtresë të hollë UV - ultraviolet FS - monografi farmakopeale

FSP - artikull farmakopeial i ndërmarrjes

PREZANTIMI

Zgjerimi i arsenalit të barnave shoqërohet me zhvillimin e metodave të reja për analizën e tyre. Kjo për faktin se rendimenti dhe cilësia e produkteve përfundimtare të prodhimit kimik dhe farmaceutik varet jo vetëm nga zbatimi i rreptë i procesit në përputhje me rregulloret teknologjike, nga cilësia e lëndëve të para fillestare, por edhe nga përdorimi. të metodave të besueshme të kontrollit hap pas hapi. Prandaj, vëmendje e konsiderueshme i është kushtuar përmirësimit të kontrollit të cilësisë së barnave në dekadën e fundit.

Siç dihet, kontrolli analitik kryhet në të gjitha fazat e prodhimit, duke filluar nga kontrolli i cilësisë në hyrje të lëndëve të para dhe duke përfunduar me analizën e produkteve të gatshme. Ky kontroll duhet të kryhet në përputhje të plotë me dokumentacionin aktual rregullator (farmakopeja kombëtare, FSP). Dokumenti rregullator përmban një sërë metodash zyrtare për studimin e substancave dhe formave të tyre të dozimit, bazuar në rezultatet e analizës së të cilave vendoset çështja e mundësisë së përdorimit të tyre në praktikën mjekësore. Në këtë rast vërtetohet cilësia e mirë e barit, e cila konsiston në përcaktimin e origjinalitetit dhe zbulimin e papastërtive dhe përmbajtjen sasiore të substancës aktive.

Kërkesat kryesore të analizës farmakopeale të barnave janë ndjeshmëria e lartë, specifika, saktësia dhe shpejtësia. Këto kërkesa plotësohen nga metodat fizike dhe fiziko-kimike të analizës bazuar në matjet e konstanteve të caktuara të qenësishme në secilën substancë.

Në thelb, metodat fiziko-kimike ndahen në tre grupe:

1) metodat optike të bazuara në ligjet e bashkëveprimit të materies me rrezatimin elektromagnetik;

2) metodat kromatografike për ndarjen dhe përcaktimin sasior të përzierjes së substancave, bazuar në diferencën në shpërndarjen e komponentëve ndërmjet fazës së lëvizshme dhe asaj stacionare;

3) metodat elektrokimike të analizës, të cilat bazohen në vetitë elektrokimike të substancës.

Metodat optike përfshijnë: refraktometri,

polarimetria, spektrofotometria, fotokolorimetria, fototurbidimetria, fluorimetria. Nga metodat e listuara, dy të fundit nuk merren parasysh për shkak të përdorimit të tyre të kufizuar në praktikën farmaceutike.

Përdoren këto metoda të ndarjes kromatografike: kromatografi letre, kromatografi me shtresë të hollë (TLC), kromatografi gaz-lëng (GLC), kromatografi e lëngshme me performancë të lartë (HPLC).

HPLC. Shfaqet shkathtësia e tyre e jashtëzakonshme, duke i lejuar ata të zgjidhin problemet e ndarjes së përzierjeve të substancave të ndryshme - nga komponimet organike më të thjeshta deri tek ato më komplekse. Një numër shembujsh përshkruajnë përdorimin e këtyre metodave për qëllime të analizës farmakopeale.

Metodat elektrokimike përfshijnë: potenciometrinë, konduktometrinë, polarografinë, etj. Në manual pasqyrohet vetëm potenciometria - një metodë e bazuar në matjen e diferencës në potencialet e ekuilibrit pothuajse në mungesë të rrymës ndërmjet elektrodës treguese dhe elektrodës referente të zhytur në tretësirën e analizuar.

Duke pasur parasysh se manuali është i destinuar kryesisht për studentët me korrespondencë, jepen pyetje për vetë-studim dhe detyra testimi mbi metodat e propozuara fizike dhe kimike.

Gjatë përgatitjes së këtij manuali trajnimi është përfshirë vetëm ai informacion, njohja e të cilit është e nevojshme për analizat cilësore dhe sasiore të substancave, barnave dhe zbulimin e papastërtive në to.

KAPITULLI 1. REFRAKTOMETRIA

Refraktometria përdoret gjerësisht në fusha të ndryshme të kimisë. Përdoret në analizat farmaceutike, biokimike, analiza ushqimore etj. Kjo metodë është metoda më e vjetër e kërkimit optik që përdoret në kimi. Bazuar në vlerat e indekseve të thyerjes dhe densitetit, Isaac Newton nxori përfundime interesante për përbërjen e kripërave, alkoolit etilik dhe substancave të tjera. Në mesin e shekullit të 18-të. Akademiku i Petersburgut Johann Euler kreu një sërë matjesh të indekseve të thyerjes së një numri lëngjesh.

Mikhail Lomonosov punoi në projektimin dhe përmirësimin e një prej refraktometrave të parë nga 1752 deri në 1762.

Një rol të madh në përhapjen e refraktometrisë luajti puna e profesorëve gjermanë Abbe (1840-1905) dhe Pulfrich (1858-1927), të cilët krijuan dizajne të përshtatshme të refraktometrisë që përdoren gjerësisht sot.

Përdorimi i gjerë i refraktometrisë si metodë analize është lehtësuar nga kombinimi i saktësisë së lartë, thjeshtësisë teknike dhe aksesueshmërisë. Indeksi i thyerjes është një nga konstantet e pakta fizike që mund të matet me saktësi shumë të lartë dhe pak kohë, duke përdorur një sasi të vogël materiali. Refraktometrat ekzistues bëjnë të mundur përcaktimin e indeksit të thyerjes me një saktësi të rendit 10-4 -10-5, d.m.th. deri në 0,01% dhe madje deri në 0,001% të vlerës së matur. Kjo kërkon 0,05-0,5 g të substancës, dhe e gjithë procedura e matjes zbret në marrjen e leximeve në një shkallë dhe llogaritjet e thjeshta. Koha e nevojshme për të matur dhe kryer llogaritjet përkatëse është vetëm disa minuta. Një avantazh i rëndësishëm i metodës është mundësia e regjistrimit automatik të indekseve refraktive.

dy media transparente

Kur punoni me tretësirat e substancave, së pari matni indeksin e thyerjes së tretësit, i cili zbritet nga indeksi i thyerjes së tretësirës. Përcaktimi kryhet në një temperaturë prej 200 C dhe gjatësia e valës së linjës D të spektrit të natriumit është 589.3 nm, dhe indeksi i thyerjes tregohet me indekse -

nD 20.

Më poshtë janë treguesit e thyerjes së tretësve më të përdorur: ujë - 1,3330; metanol – 1,3286; etanol – 1,3613; aceton –1,3591; kloroform – 1,4456.

Ndikimi i temperaturës në refraktometri eliminohet nga blloqet e prizmit termostatik me xhaketa uji. Në temperatura 10

Siç dihet, analiza farmakopeale synon të përcaktojë vërtetësinë, të përcaktojë pastërtinë dhe të përcaktojë sasinë e substancës aktive ose përbërësve të një forme komplekse dozimi. Pavarësisht se secila prej këtyre fazave të analizës farmakopeale zgjidh problemin e vet specifik, ato nuk mund të konsiderohen të veçuara. Kështu, kryerja e një reagimi autenticiteti ndonjëherë jep një përgjigje për praninë ose mungesën e një papastërti të veçantë. Në përgatitjen PAS-Na, kryhet një reaksion cilësor me një tretësirë ​​të klorurit të hekurit (III) (pasi një derivat i acidit salicilik formon një ngjyrë vjollce-të kuqe). Por shfaqja e një precipitati në këtë tretësirë ​​pas tre orësh tregon praninë e një përzierjeje të acidit 5-aminosalicilik, i cili nuk është farmakologjikisht aktiv. Megjithatë, shembuj të tillë janë mjaft të rrallë.

Përcaktimi i disa konstanteve - pika e shkrirjes, densiteti, shkalla specifike e përthithjes - lejon që dikush të nxjerrë njëkohësisht një përfundim në lidhje me origjinalitetin dhe pastërtinë e një substance të caktuar. Meqenëse metodat për përcaktimin e konstanteve të caktuara për barna të ndryshme janë identike, ne i studiojmë ato në metodat e përgjithshme të analizës. Ju do të keni nevojë për njohuri mbi bazat teorike dhe aftësinë për të bërë përcaktime në analizën e mëvonshme të grupeve të ndryshme të barnave.

Analiza farmaceutike është një pjesë integrale e analizës farmaceutike dhe është një grup metodash për studimin e barnave dhe formave të dozimit, të përcaktuara në Farmakopenë Shtetërore dhe ND të tjera (FS, FSP, GOST) dhe përdoren për të përcaktuar origjinalitetin, pastërtinë dhe analizën sasiore.

Në kontrollin e cilësisë së barnave përdoren metoda të analizës fizike, fiziko-kimike, kimike dhe biologjike. Testet ND përfshijnë disa faza kryesore:

përshkrim;

tretshmëria;

autenticiteti;

konstantet fizike (pikat e shkrirjes, vlimit ose distilimit, indeksi i thyerjes, rrotullimi specifik, dendësia, karakteristikat spektrale);

transparenca dhe ngjyra e zgjidhjeve;

aciditeti ose alkaliniteti, pH e tretësirës;

përcaktimi i papastërtive;

humbje peshe pas tharjes;

hiri i sulfatuar;

sasia.

Në varësi të natyrës së barit, disa nga këto teste mund të mungojnë ose të tjera të përfshira, si vlera e acidit, vlera e jodit, vlera e saponifikimit, etj.

Një monografi private farmakopeale për çdo ilaç fillon me një seksion "Përshkrim", i cili kryesisht karakterizon vetitë fizike të një substance:

gjendja e grumbullimit (e ngurtë, e lëngët, e gaztë), nëse lënda është e ngurtë, atëherë përcaktohet shkalla e dispersionit të saj (kristalor i imët, i trashë-kristalor), dhe forma e kristaleve (në formë gjilpëre, cilindrike).

ngjyra e substancës – një tregues i rëndësishëm i autenticitetit dhe pastërtisë. Shumica e barnave janë pa ngjyrë, domethënë janë të bardha. Ngjyrosja vizualisht kur përcakton gjendjen e grumbullimit. Një sasi e vogël e substancës vendoset në një shtresë të hollë në një pjatë Petri ose gotë orë dhe shihet në një sfond të bardhë. Në Fondin Shtetëror X1 ekziston një artikull "Përcaktimi i shkallës së bardhësisë së barnave pluhur". Përcaktimi kryhet duke përdorur metodën instrumentale duke përdorur fotometra të veçantë "Specol-10". Ai bazohet në karakteristikat spektrale të dritës së reflektuar nga një kampion droge. Ata masin të ashtuquajturat koeficienti i reflektimit– raporti i madhësisë së fluksit të dritës së reflektuar me madhësinë e atij që ka rënë. Reflektimet e matura bëjnë të mundur përcaktimin e pranisë ose mungesës së një ngjyre ose nuancë gri në substanca duke llogaritur shkallën e bardhësisë (α) dhe shkallën e shkëlqimit (β). Meqenëse shfaqja e nuancave ose ndryshimeve të ngjyrave është, si rregull, pasojë e proceseve kimike - oksidimi, reduktimi, madje edhe kjo fazë fillestare e studimit të substancave na lejon të nxjerrim përfundime. Kjo metoda është e përjashtuar nga botimi GF X11.

Erë të përcaktuara rrallë menjëherë pas hapjes së paketimit në një distancë prej 4-6 cm. Asnjë erë pas hapjes së paketimit menjëherë sipas metodës: 1-2 g të substancës shpërndahen në mënyrë të barabartë në një gotë ore me diametër 6-8 cm dhe pas 2 minutash era përcaktohet në një distancë prej 4-6 cm.

Mund të ketë udhëzime në seksionin "Përshkrimi". mbi mundësinë e ndryshimeve të substancave gjatë ruajtjes. Për shembull, në përgatitjen e klorurit të kalciumit tregohet se është shumë higroskopik dhe tretet në ajër, dhe jodidi i natriumit - në ajër bëhet i lagësht dhe dekompozohet me lëshimin e hidratit kristalor, në rast të motit ose mospërputhjes me kushtet e kristalizimi në prodhim, nuk do të ketë më pamjen apo formën e dëshiruar kristalet, as ngjyrën.

Pra, studimi i paraqitjes së një substance është faza e parë, por shumë e rëndësishme në analizën e substancave dhe është e nevojshme që të mund të lidhim ndryshimet në pamje me ndryshimet e mundshme kimike dhe të nxjerrim përfundimin e saktë.

Tretshmëria(GF XI, numri 1, f. 175, GF XII, numri 1, f. 92)

Tretshmëria është një tregues i rëndësishëm i cilësisë së një substance medikamentoze. Si rregull, RD përmban një listë të caktuar tretësish që karakterizojnë më plotësisht këtë veti fizike, në mënyrë që në të ardhmen të mund të përdoret për të vlerësuar cilësinë në një ose një fazë tjetër të studimit të kësaj substance medicinale. Kështu, tretshmëria në acide dhe alkale është karakteristikë e përbërjeve amfoterike (oksidi i zinkut, sulfonamidet), acidet organike dhe bazat (acidi glutamik, acidi acetilsalicilik, kodeina). Një ndryshim në tretshmëri tregon praninë ose shfaqjen gjatë ruajtjes së papastërtive më pak të tretshme, gjë që karakterizon një ndryshim në cilësinë e tij.

Në PS XI, tretshmëria do të thotë jo një konstante fizike, por një veti e shprehur me të dhëna të përafërta dhe që shërben për karakteristikat e përafërta të barnave.

Së bashku me pikën e shkrirjes, tretshmëria e një lënde në temperaturë dhe presion konstant është një nga parametrat, sipas të cilit vendosin autenticiteti dhe pastërtia (cilësia e mirë) e pothuajse të gjitha barnave.

Rekomandohet përdorimi i tretësve me polaritete të ndryshme (zakonisht tre); Nuk rekomandohet përdorimi i tretësve me valë të ulët dhe të ndezshëm (dietil eter) ose shumë toksikë (benzen, klorur metilen).

Pharmacopoeia XI ed. pranuar dy mënyra për të shprehur tretshmërinë :

Në pjesë (raporti i substancës dhe tretësit). Për shembull, për klorurin e natriumit sipas FS, tretshmëria në ujë shprehet në raportin 1:3, që do të thotë se nuk nevojiten më shumë se 3 ml ujë për të tretur 1 g të substancës medikamentoze.

Në terma konvencionale(GF XI, f. 176). Për shembull, për salicilatin e natriumit në PS tretshmëria jepet në terma të kushtëzuar - "shumë lehtësisht i tretshëm në ujë". Kjo do të thotë që për të tretur 1 g lëndë nevojitet deri në 1 ml ujë.

Botimi i Farmakopesë XII vetëm me kusht (në terma 1 g)

Termat konvencionale dhe kuptimet e tyre janë dhënë në tabelë. 1. (GF XI, numri 1, f. 176, GF XII, numri 1, f. 92).

Termat konvencionale të tretshmërisë

Termi i kushtëzuar korrespondon me një gamë të caktuar të vëllimeve të tretësit (ml), brenda të cilit duhet të ndodhë shpërbërja e plotë e një gram të substancës medikamentoze.

Procesi i tretjes kryhet në tretës në temperatura 20°С. Për të kursyer substancën medicinale dhe tretësin, masa e barit peshohet në atë mënyrë (me një saktësi prej 0,01 g) që të shpenzohen jo më shumë se 100 ml për të vendosur tretshmërinë e ujit dhe jo më shumë se 10- 20 ml tretës organikë.

Substanca (substanca) medicinale konsiderohet e tretshme , nëse nuk zbulohen grimca të substancës në tretësirë ​​kur vëzhgohen në dritën e transmetuar.

Metodologjia . (1 mënyrë). Një masë e peshuar e barit, e grirë më parë në një pluhur të imët, i shtohet një vëllimi të matur të tretësit që korrespondon me volumin e tij minimal dhe tundet. Pastaj, në përputhje me tabelën. 1, shtoni gradualisht tretësin në vëllimin e tij maksimal dhe tundeni vazhdimisht për 10 minuta. Pas kësaj kohe, asnjë grimcë e substancës nuk duhet të zbulohet në tretësirë ​​me sy të lirë. Për shembull, peshoni 1 g benzoat natriumi, vendoseni në një provëz me 1 ml ujë, tundni dhe shtoni gradualisht 9 ml ujë, sepse. benzoati i natriumit është lehtësisht i tretshëm në ujë (nga 1 deri në 10 ml).

Për të tretshme ngadalë barnat që kërkojnë më shumë se 10 minuta për tretje të plotë, Lejohet ngrohja në një banjë uji deri në 30°C. Vëzhgimi kryhet pas ftohjes së tretësirës në 20°C dhe lëkundjes së fortë për 1-2 minuta. Për shembull, kafeina tretet ngadalë në ujë (1:60), kodeina është ngadalë dhe pak e tretshme në ujë (100-1000), glukonati i kalciumit tretet ngadalë në 50 pjesë të ujit, laktat kalciumi tretet ngadalë në ujë, acidi borik. tretet ngadalë në 7 orë .glicerinë.

Metoda 2. Tretshmëria, e shprehur në pjesë, tregon vëllimin e tretësit në ml që kërkohet për të tretur 1 g të një substance.

Metodologjia. (Metoda e dytë) Masa e barit e peshuar në një peshore dore tretet në vëllimin e specifikuar ND të tretësit. Nuk duhet të ketë grimca të substancës së patretur në tretësirë.

Tretshmëria në pjesë tregohet në monografitë farmakopeale për barnat e mëposhtme: acid borik(shkrihet në 25 pjesë ujë, 25 pjesë alkool, 4 pjesë ujë të vluar); jodidi i kaliumit(i tretshëm në 0,75 pjesë ujë, 12 pjesë alkool dhe 2,5 pjesë glicerinë); brom natriumi(i tretshëm në 1,5 pjesë ujë, 10 pjesë alkool); bromur kaliumi(i tretshëm në 1,7 pjesë ujë dhe alkool të përzier); klorur kaliumi dhe klorur natriumi(r. në 3 orë ujë).

Në rastin e testimit, për shembull, bromurit të natriumit, veproni si më poshtë: peshoni 1 g brom natriumi në një peshore dore, shtoni 1,5 ml ujë dhe tundeni derisa të treten plotësisht.

Monografi e përgjithshme farmakopeale " Tretshmëria » Botimi SP XII plotësohet me një përshkrim të metodave për përcaktimin e tretshmërisë së substancave me tretshmëri të panjohur dhe të njohur.

Pika e shkrirjes (T ° pl)

Pika e shkrirjes është një karakteristikë konstante pastërti substancave dhe në të njëjtën kohë autenticiteti i tij. Nga fizika dihet se pika e shkrirjes është temperatura në të cilën faza e ngurtë e një lënde është në ekuilibër me shkrirjen. Substanca e pastër ka një pikë të qartë shkrirjeje. Meqenëse barnat mund të kenë një sasi të vogël papastërtish, nuk do të shohim më një pamje kaq të qartë. Në këtë rast, përcaktohet intervali në të cilin substanca shkrihet. Zakonisht ky interval qëndron brenda 2 ◦ C. Një interval më i zgjatur tregon praninë e papastërtive brenda kufijve të papranueshëm.

Sipas formulimit të Fondit Shtetëror X1 nën pika e shkrirjes substancat kuptojnë intervali i temperaturës ndërmjet fillimit të shkrirjes (shfaqja e pikës së parë të lëngut) dhe përfundimit të shkrirjes (kalimi i plotë i substancës në gjendje të lëngshme).

Nëse substanca ka një fillim ose fund të paqartë të shkrirjes, përcaktoni temperatura e fillimit ose fundit të shkrirjes. Ndonjëherë një substancë shkrihet me dekompozim, në këtë rast përcaktohet temperatura e dekompozimit, pra temperatura në të cilën ndodh ndryshim i papritur në substancë(p.sh. shkumëzimi).

Metodat përcaktimi i pikës së shkrirjes

Zgjedhja e metodës është e diktuar dy pika:

qëndrueshmëria e substancës kur nxehet dhe

aftësia për t'u grirë në pluhur.

Sipas botimit GF X1, ekzistojnë 4 mënyra për të përcaktuar T ° pl:

Metoda 1 - për substancat që mund të bluhen në pluhur dhe janë të qëndrueshme kur nxehen

Metoda 1a - për substancat që mund të bluhen në pluhur, Jo rezistente ndaj nxehtësisë

Metodat 2 dhe 3 - për substancat që nuk treten në pluhur

Metodat 1, 1a dhe 2 përfshijnë përdorimin e 2 pajisjeve:

PTP ( pajisje për përcaktimin e Tmel): i njohur për ju nga kursi i kimisë organike, ju lejon të përcaktoni pikën e shkrirjes së substancave brenda nga 20 ◦ Nga deri në 360 ◦ ME

Një pajisje e përbërë nga një balonë me fund të rrumbullakët me një provëz të mbyllur në të, në të cilën është futur një termometër me një kapilar të bashkangjitur që përmban substancën fillestare. Balona e jashtme mbushet deri në ¾ e vëllimit me lëng ftohës:

ujë (ju lejon të përcaktoni shkrirjen deri në 80 ◦ C),

Vaj vazelinë ose silikone të lëngëta, acid sulfurik i koncentruar (ju lejon të përcaktoni shkrirjen deri në 260 ◦ C),

një përzierje e acidit sulfurik dhe sulfatit të kaliumit në një raport 7:3 (ju lejon të përcaktoni Tmel mbi 260 ◦ C)

Teknika është e përgjithshme, pavarësisht nga pajisja.

Substanca e thatë e bluar imët vendoset në një kapilar me madhësi mesatare (6-8 cm) dhe futet në pajisje në një temperaturë 10 gradë më të ulët se sa pritej. Pas rregullimit të shkallës së rritjes së temperaturës, diapazoni i ndryshimeve të temperaturës në substancë në kapilar regjistrohet në të njëjtën kohë, kryhen të paktën 2 përcaktime dhe merret mesatarja aritmetike.

Pika e shkrirjes përcaktohet jo vetëm për substancat e pastra, por edhe për derivatet e tyre– oksimet, hidrozonet, bazat dhe acidet e izoluara nga kripërat e tyre.

Ndryshe nga GF XI në GF XII ed. temperatura e shkrirjes në metodën kapilare do të thotë jo intervali midis fillimit dhe fundit të shkrirjes, por temperatura fundore e shkrirjes , e cila është në përputhje me Farmakopenë Evropiane.

Kufijtë e temperaturës së distilimit (T° kip.)

Vlera GF përcaktohet si intervali ndërmjet pikave fillestare dhe përfundimtare të vlimit në presion normal. (101,3 kPa – 760 mmHg). Intervali është zakonisht 2°.

Nën fillestar Pikë vlimi kuptojnë temperaturën në të cilën pesë pikat e para të lëngut distilohen në marrës.

Nën finalen– temperatura në të cilën 95% e lëngut kalon në marrës.

Një interval më i zgjatur sesa tregohet në FS përkatëse tregon praninë e papastërtive.

Pajisja për përcaktimin e TPP përbëhet nga

një balonë rezistente ndaj nxehtësisë me një termometër në të cilin vendoset lëngu,

frigorifer dhe

balonë marrëse (cilindër i shkallëzuar).

Dhoma e Tregtisë dhe Industrisë, vëzhguar eksperimentalisht çojnë në presion normal sipas formulës:

Tispr = Tnabl + K· (p – p 1)

Ku: p – presioni normal barometrik (760 mm Hg)

p 1 – presioni barometrik gjatë eksperimentit

K - rritja e pikës së vlimit për 1 mm presion

Kështu, duke përcaktuar kufijtë e temperaturës së distilimit autenticiteti dhe pastërtia eter, etanol, kloroetil, fluorotan.

GFS GF XII " Përcaktimi i kufijve të temperaturës për distilim » plotësuar me përkufizim pikat e vlimit dhe privatisht FS rekomandon përcaktimin pika e ngurtësimit ose e vlimit për barnat e lëngshme.

Dendësia(GF XI, numri 1, f. 24)

Dendësia është masa për njësi vëllimi të një lënde. E shprehur në g/cm3.

ρ = m/ V

Nëse masa matet në gram dhe vëllimi në cm3, atëherë dendësia është masa e 1 cm3 e një lënde.

Dendësia përcaktohet duke përdorur një piknometër (deri në 0.001). ose hidrometër (saktësia e matjes deri në 0.01)

Për dizajnin e pajisjeve, shihni edicionin GF X1.

Këto përfshijnë: përcaktimin e temperaturave të shkrirjes dhe ngurtësimit, si dhe kufijtë e temperaturës së distilimit; përcaktimi i densitetit, indeksi i thyerjes (refraktometria), rrotullimi optik (polarimetria); spektrofotometri - ultravjollcë, infra të kuqe; fotokolorimetria, spektrometria e emetimit dhe thithjes atomike, fluorimetria, spektroskopia e rezonancës magnetike bërthamore, spektrometria e masës; kromatografia - adsorbimi, shpërndarja, shkëmbimi i joneve, gazi, lëngu me performancë të lartë; elektroforezë (frontale, zonale, kapilare); metodat elektrometrike (përcaktimi potenciometrik i pH, titrimi potenciometrik, titrimi amperometrik, voltammetria).

Përveç kësaj, është e mundur të përdoren metoda alternative ndaj atyre farmakopeale, të cilat ndonjëherë kanë karakteristika analitike më të avancuara (shpejtësia, saktësia e analizës, automatizimi). Në disa raste, një kompani farmaceutike blen një pajisje, përdorimi i së cilës bazohet në një metodë që nuk është përfshirë ende në Farmakope (për shembull, metoda e spektroskopisë Romanov - dikroizmi optik). Ndonjëherë këshillohet që teknika kromatografike të zëvendësohet me një spektrofotometrike gjatë përcaktimit të autenticitetit ose testimit të pastërtisë. Metoda farmakopeale për përcaktimin e papastërtive të metaleve të rënda me precipitim në formën e sulfideve ose tioacetamideve ka një sërë disavantazhesh. Për të përcaktuar papastërtitë e metaleve të rënda, shumë prodhues po prezantojnë metoda të analizës fizike dhe kimike të tilla si spektrometria e përthithjes atomike dhe spektrometria e emetimit atomik të plazmës së çiftuar në mënyrë induktive.

Në disa artikuj privatë të Fondit Shtetëror X, rekomandohet të përcaktohet temperatura e ngurtësimit ose pika e vlimit (sipas Fondit Shtetëror XI - "kufijtë e temperaturës së distilimit") për një numër ilaçesh të lëngshme. Pika e vlimit duhet të jetë brenda intervalit të dhënë në artikullin privat. Një interval më i gjerë tregon praninë e papastërtive.

Shumë artikuj privatë të Fondit Shtetëror X ofrojnë vlera të pranueshme të densitetit dhe më rrallë të viskozitetit, duke konfirmuar vërtetësinë dhe cilësinë e mirë të ilaçit.

Pothuajse të gjithë artikujt privatë të Fondit Shtetëror X standardizojnë një tregues të tillë të cilësisë së ilaçit si tretshmëria në tretës të ndryshëm. Prania e papastërtive në një ilaç mund të ndikojë në tretshmërinë e tij, duke e zvogëluar ose rritur atë në varësi të natyrës së papastërtisë.

Metodat fizike të analizës

Autenticiteti i substancës medicinale është konfirmuar; gjendja e grumbullimit (të ngurtë, të lëngët, të gaztë); ngjyra, aroma; forma kristalore ose lloji i substancës amorfe; higroskopia ose shkalla e motit në ajër; rezistenca ndaj dritës, oksigjenit të ajrit; paqëndrueshmëria, lëvizshmëria, ndezshmëria (e lëngjeve). Ngjyra e një lënde medicinale është një nga vetitë karakteristike që lejon identifikimin paraprak të saj.

Shkalla e bardhësisë (hija) e substancave të ngurta medicinale mund të vlerësohet me metoda të ndryshme instrumentale bazuar në karakteristikat spektrale të dritës së reflektuar nga kampioni. Për ta bërë këtë, reflektimi matet kur kampioni ndriçohet me dritë të bardhë. Reflektimi është raporti i sasisë së fluksit të dritës së reflektuar me sasinë e fluksit të dritës rënëse. Kjo ju lejon të përcaktoni praninë ose mungesën e një hije ngjyre në substancat medicinale nga shkalla e bardhësisë dhe shkalla e shkëlqimit. Për substancat e bardha ose të bardha me nuancë gri, shkalla e bardhësisë është teorikisht e barabartë me 1. Substancat për të cilat është 0,95--1,00 dhe shkalla e shkëlqimit< 0,85, имеют сероватый оттенок.

Më objektiv është vendosja e konstantave të ndryshme fizike: pika e shkrirjes (dekompozimi), pika e vlimit, dendësia, viskoziteti. Një tregues i rëndësishëm i autenticitetit është tretshmëria e ilaçit në ujë, tretësirat e acideve, alkaleve, tretësve organikë (eter, kloroform, aceton, benzen, alkool etilik dhe metil, vajra, etj.).

Konstanta që karakterizon homogjenitetin e trupave të ngurtë është pika e shkrirjes. Përdoret në analizat farmaceutike për të përcaktuar identitetin dhe pastërtinë e shumicës së substancave të ngurta të drogës. Dihet se është temperatura në të cilën një e ngurtë është në ekuilibër me fazën e lëngshme nën një fazë të avullit të ngopur. Pika e shkrirjes është një vlerë konstante për një substancë individuale. Prania edhe e një sasie të vogël të papastërtive ndryshon (si rregull, zvogëlon) pikën e shkrirjes së substancës, gjë që bën të mundur gjykimin e shkallës së pastërtisë së saj. Temperatura e shkrirjes i referohet diapazonit të temperaturës në të cilin ndodh procesi i shkrirjes së ilaçit testues nga shfaqja e pikave të para të lëngut deri në kalimin e plotë të substancës në gjendje të lëngshme. Disa komponime organike dekompozohen kur nxehen. Ky proces ndodh në temperaturën e dekompozimit dhe varet nga një sërë faktorësh, veçanërisht nga shkalla e ngrohjes. Intervalet e dhëna të temperaturës së shkrirjes tregojnë se intervali midis fillimit dhe fundit të shkrirjes së substancës medicinale nuk duhet të kalojë 2°C. Nëse kalimi i një substance nga një gjendje e ngurtë në një gjendje të lëngshme është e paqartë, atëherë në vend të intervalit të temperaturës së shkrirjes, vendoset një temperaturë në të cilën ndodh vetëm fillimi ose vetëm fundi i shkrirjes. Duhet të merret parasysh se saktësia e përcaktimit të gamës së temperaturës në të cilën shkrihet substanca e provës mund të ndikohet nga kushtet e përgatitjes së mostrës, shpejtësia e rritjes dhe saktësia e matjes së temperaturës dhe përvoja e analistit.

Pika e vlimit është intervali ndërmjet temperaturës fillestare dhe përfundimtare të vlimit në presion normal prej 760 mmHg. (101.3 kPa). Temperatura në të cilën 5 pikat e para të lëngut u distiluan në marrës quhet pika fillestare e vlimit, dhe temperatura në të cilën 95% e lëngut të transferuar në marrës quhet pika përfundimtare e vlimit. Kufijtë e specifikuar të temperaturës mund të vendosen duke përdorur makrometodën dhe mikrometodën. Duhet të kihet parasysh se pika e vlimit varet nga presioni atmosferik. Pika e vlimit vendoset vetëm për një numër relativisht të vogël të barnave të lëngshme: ciklopropan, kloroetil, eter, fluorotan, kloroform, trikloretilen, etanol.

Kur vendosni dendësinë, merrni masën e një lënde të një vëllimi të caktuar. Dendësia përcaktohet duke përdorur një piknometër ose hidrometër, duke respektuar rreptësisht regjimin e temperaturës, pasi dendësia varet nga temperatura. Kjo zakonisht arrihet duke e vendosur piknometrin në 20°C. Intervale të caktuara të vlerave të densitetit konfirmojnë origjinalitetin e alkoolit etilik, glicerinës, vajit të vazelinës, vazelinës, parafinës së ngurtë, hidrokarbureve të halogjenizuara (kloroetil, fluorotan, kloroform), solucionit formaldehid, eterit për anestezi, nitritit amil, etj.

Viskoziteti (fërkimi i brendshëm) është një konstante fizike që konfirmon vërtetësinë e substancave medicinale të lëngshme. Ka viskozitet dinamik (absolut), kinematik, relativ, specifik, të reduktuar dhe karakteristik. Secila prej tyre ka njësitë e veta të matjes.

Për të vlerësuar cilësinë e përgatitjeve të lëngshme që kanë një konsistencë viskoze, për shembull, glicerina, vazelina, vajrat, zakonisht përcaktohet viskoziteti relativ. Është raporti i viskozitetit të lëngut në studim me viskozitetin e ujit, i marrë si unitet.

Tretshmëria nuk konsiderohet si një konstante fizike, por si një veti që mund të shërbejë si një karakteristikë treguese e ilaçit të testuar. Së bashku me pikën e shkrirjes, tretshmëria e një lënde në temperaturë dhe presion konstant është një nga parametrat me të cilin përcaktohet vërtetësia dhe pastërtia e pothuajse të gjitha substancave medicinale.

Metoda për përcaktimin e tretshmërisë bazohet në faktin se një kampion i një medikamenti të bluar më parë (nëse është e nevojshme) i shtohet një vëllimi të matur të tretësit dhe përzihet vazhdimisht për 10 minuta në (20±2)°C. Një ilaç konsiderohet i tretur nëse nuk vërehen grimca të substancës në tretësirë ​​në dritën e transmetuar. Nëse ilaçi kërkon më shumë se 10 minuta për t'u tretur, atëherë ai klasifikohet si i tretshëm ngadalë. Përzierja e tyre me tretësin nxehet në një banjë uji deri në 30°C dhe plotësia e tretjes vërehet pas ftohjes në (20±2)°C dhe tundjes së fortë për 1-2 minuta.

Metoda e tretshmërisë fazore bën të mundur përcaktimin sasior të pastërtisë së një substance medikamentoze duke matur me saktësi vlerat e tretshmërisë. Thelbi i vendosjes së tretshmërisë së fazës është shtimi vijues i një mase në rritje të barit në një vëllim konstant të tretësit. Për të arritur një gjendje ekuilibri, përzierja i nënshtrohet lëkundjes së zgjatur në një temperaturë konstante, dhe më pas përmbajtja e substancës së tretur të drogës përcaktohet duke përdorur diagrame, d.m.th. përcaktoni nëse produkti i testimit është një substancë individuale ose një përzierje. Metoda e tretshmërisë së fazës është objektive dhe nuk kërkon pajisje të shtrenjta ose njohuri për natyrën dhe strukturën e papastërtive. Kjo lejon që ajo të përdoret për analiza cilësore dhe sasiore, si dhe për studimin e stabilitetit dhe marrjen e mostrave të pastruara të barit (deri në një pastërti prej 99.5%). Një avantazh i rëndësishëm i metodës është aftësia për të dalluar izomerët optikë dhe format polimorfike droga. Metoda është e zbatueshme për të gjitha llojet e përbërjeve që formojnë zgjidhje të vërteta.

Metodat fiziko-kimike

Ato po bëhen gjithnjë e më të rëndësishme për qëllime të identifikimit objektiv dhe kuantifikimit të substancave medicinale. Një rol të rëndësishëm në analizat farmaceutike luan edhe analiza jo destruktive (pa shkatërruar objektin e analizuar), e cila është përhapur në industri të ndryshme. Për zbatimin e tij janë të përshtatshme shumë metoda fiziko-kimike, në veçanti spektroskopia optike, NMR, PMR, UV dhe IR, etj.

Në analizat farmaceutike përdoren më gjerësisht metodat fiziko-kimike, të cilat mund të klasifikohen në këto grupe: metoda optike; metodat e bazuara në thithjen e rrezatimit; metodat e bazuara në emetimin e rrezatimit; metoda të bazuara në përdorimin e një fushe magnetike; metoda elektrokimike; metodat e ndarjes; metodat termike.

Shumica e metodave të listuara (me përjashtim të atyre optike, elektrokimike dhe termike) përdoren gjerësisht për të përcaktuar strukturën kimike të përbërjeve organike.

Metodat fiziko-kimike të analizës kanë një sërë përparësish mbi metodat kimike klasike. Ato bazohen në përdorimin e vetive fizike dhe kimike të substancave dhe në shumicën e rasteve karakterizohen nga shpejtësia, selektiviteti, ndjeshmëria e lartë dhe mundësia e unifikimit dhe automatizimit.